podstawowe narzędzia i techniki inżynierii genetycznej

PODSTAWOWE NARZĘDZIA
I TECHNIKI
INŻYNIERII GENETYCZNEJ

​Enzymy

• enzymy restrykcyjne - rozcinanie DNA (sekwencje palindromowe)

• ligazy

• polimerazy DNA

​Analiza restrykcyjna

Analiza restrykcyjna polega na trawieniu DNA wybranymi enzymami restrykcyjnymi, a następnie porównywaniu liczby i długości powstałych fragmentów.

​Elektroforeza

https://www.youtube.com/watch?v=9YFuSa47prw&ab_channel=ADAMEDSmartUP

Multiple Choice

Związki które przecinają DNA w miejscach o ściśle określonej sekwencji nukleotydów to

• enzymy polimerazy

• enzymy restrykcyjne

• cząsteczki DNA

• wektory

Multiple Choice

Sekwencją palindromową jest sekwencja: 

• TATAT
• GGAA
• AGTA
• GCAC

Multiple Choice

Elektroforeza wykorzystywana jest w inżynierii genetycznej do:

• powielania wybranego fragmentu DNA

• ustalania kolejności nukleotydów w DNA

• rozdzielania cząsteczek DNA o rożnych właściwościach

• przecinania DNA w ściśle określonych miejscach

​Hybrydyzacja DNA z użyciem sondy molekularnej

​Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR)

https://www.youtube.com/watch?v=bKW-qoScKvc&ab_channel=ADAMEDSmartUP

Multiple Choice

Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR) wykorzystywana jest do:

• rozdzielania cząsteczek o różnych właściwościach

• ustalania kolejności nukleotydów w DNA

• powielania/kopiowania wybranego fragmentu DNA

• przecinania DNA w ściśle określonych miejscach

Multiple Select

Annealing to : 

• powstawanie wiązań glikozydowych 

• elongacja 
• powstawanie wiązań peptydowych 
•  hybrydyzacja odcinków starterowych

​sekwencjonowanie DNA

https://www.youtube.com/watch?v=ONGdehkB8jU&ab_channel=yourgenome

​klonowanie DNA

Klonowanie DNA jest używane do wielu celów. Jako przykład, za cel przyjmiemy syntezę białek (na przykład ludzkiej insuliny) za pomocą komórek bakterii. Podstawowymi krokami są:

1. Rozcięcie plazmidu i "wklejenie" do niego genu. Ten proces opiera się na użyciu enzymów restrykcyjnych (które rozcinają nici DNA) i ligazie DNA (która łączy nici DNA).

2. Wprowadzenie plazmidu do komórki bakterii. Użycie typowania antybiotykowego w celu zidentyfikowania szczepu, który przyjął plazmid.

3. Hodowla do dużych ilości komórki bakterii i użycie ich jako "fabryk" do produkcji białek. Zebranie zawiesiny białek z bakterii i oczyszczenie jej.

​biblioteki genomowe i cDNA

Biblioteki genomowe - służą do przechowywania genomów organizmów.
Biblioteki cDNA - przechowuje się same sekwencje kodujące. Przechowuje się cząsteczki mRNA, które w wyniku odwrotnej transkrypcji zostały przepisane na DNA.

​transformacja genetyczna

Proces wprowadzania obcego DNA do komórki.

Metody pośrednie - opierają się na użyciu wektorów.

Metody bezpośrednie - polegają na wykorzystaniu np. środków chemicznych zwiększających przepuszczalność błony.

​Źródła

• https://powtorkazbiologii.pl/enzymy-restrykcyjne/

• https://image.slideserve.com/818352/slide12-l.jpg

• https://lkb.pl/aparatura/elektroforeza/aparaty-do-elektroforezy-poziomej

• https://www.encyklopedialesna.pl/haslo/elektroforeza-dna-w-zelu-2/

• https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/f/f6/Chr2_orang_human.jpg

• https://facellitate.com/advantages-and-disadvantages-of-pcr-technology/

• https://pl.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/overview-dna-cloning