Урок без названия

ЛР, ЛРС, содержащие флавоноиды, кумарины и хромоны

Коломиец Наталья Эдуардовна

доктор фармацевтических наук, профессор

План:

1.

Общая характеристика флавоноидов.

2.

Классификация.

3.

Основные фармакологические свойства.

4.

Сушка, хранение.

5.

Физико-химические свойства флавоноидов.

6.

Ассортимент ЛРС, включенного в ГФ РФ.

7.

Общая характеристика кумаринов.

8.

Классификация

9.

Основные фармакологические свойства.

10.

Сушка, хранение.

11.

Физико-химические свойства кумаринов

12.

Ассортимент ЛРС, включенного в ГФ РФ.

13.

Общая характеристика хромонов.

14.

Основные фармакологические свойства.

15.

Физико-химические свойства

Физико-химические свойства кумаринов

Общая характеристика флавоноидов

флавоноиды (лат. flavus— желтый, греч. eidos – вид)

В настоящее время известно более 6500

индивидуальных флавоноидов

1949 г. Гейссман предложил термин флавоноиды

1936 г. Альберт де Сент-Дьёрди опубликовал работу,

посвящённую возможной биологической роли

флавоноидов для человека

Локализация флавоноидов

Содержание флавоноидов

в среднем содержится 0,5-5% флавоноидов
«Рекордсмен»- бутоны софоры японской (содержат до 20-30%)

Богаты флавоноидами высшие растения семейств: розоцветные,
бобовые, гречишные, астровые, яснотковые и др.
В низших растениях встречаются в зеленых водорослях (ряски),
споровых (мхи, папоротники), хвощах
У некоторых насекомых (мраморно-белая бабочка).

Флавоноиды–
фенольные соединения,
состоящие из двух
бензольных колец
(А и В), соединенных
между собой
трехуглеродной цепочкой

(С6-С3-С6)

Флавоноиды- вещества

дифенилпропанового ряда производные
пирана (флавана), или γ-пирона

флавон

Многообразие флавоноидов обусловлено:

• Структурными изменениями пропанового фрагмента;
• Наличием различных радикалов в ароматической

части молекулы (кольцах А и В);

• Степенью гликозилирования (количеством молекул

сахара);

• Местом присоединения углеводных остатков и их

природой;

• Конфигурацией гликозидных связей и характером

сочленения агликона с углеводной частью ( О-
гликозиды, С-гликозиды).

Кроме

собственно

флавоноидов

в

природе

встречаются

их

димерные

соединения

–

бифлавоноиды.

1. Катехины (флаван-3-ол)
(в составе танинов)

Классификация флавоноидов

O

OH

OH

OH

OH
HO

2. Лейкоцианидины
(флаван-3,4-диол)

O

OH

OH

OH

OH
HO

OH

3. Антоцианидины
(в кислой среде имеют
розовую окраску; в щелочной
– синюю, голубую)

4. Флаваноны
(ликвиритин)

5. Флаванонолы

O

OH

OH

OH
HO

OH

O

6. Флавоны
(апигенин,
лютеолин)

O

OH

OH
HO

O

7. Флавонолы
(кемпферол, кверцетин,
мирицетин)

O

OH

OH
HO

OH

O

8. Халконы
OH

O

9. Ауроны

10. Изофлавоны

11. Ксантоны (мангиферин)

12. Фуранохромоны (келлин)

O

O

O

Основные фармакологические

свойства флавоноидов

1) Р-витаминное. Многие флавоноиды уменьшают

хрупкость кровеносных капилляров и проницаемость
стенок кровеносных сосудов, усиливают действие
аскорбиновой кислоты (софора японская, зверобой
продырявленный, рябина черноплодная, боярышник и пр.)

2) Диуретическое. Для флавоноидов характерно мягкое

диуретическое и гипоазотемическое действие (василек
синий, хвощ полевой, стальник полевой, фиалка,
золотарник канадский, череда трехраздельная ).

3) Желчегонное. При холециститах, дискинезиях желчных

путей, желчно-каменной болезни и гепатитах
(бессмертник песчаный, пижма обыкновенная, володушка
многожильчатая).

4) Кровоостанавливающее. При маточных,

геморроидальных, носовых кровотечениях (перец
водяной, спорыш, горец почечуйный).

5) Кардиотоническое. Препараты цветков и плодов

боярышника при функциональных расстройствах
сердечной деятельности.

6) Седативное(пустырник)
7) Противоязвенное,противовоспалительное,

спазмолитическое и антисекреторное действие при
язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки
(сушеница топяная, солодка, датиска коноплевая)

8) Гипогликемическое, гипоазотемическое(створки

плодов фасоли).

Противовирусное действиефлавоноидов было впервые
экспериментально подтверждено в конце ХХ века. Так,
было

показано,

что

практически

все

известные

флавоноиды

обладают

способностью

подавлять

активность нейраминидазы (фермент, входящий в состав
оболочек некоторых вирусов).
H.J. Jeong et al., 2009

Гемагглютинин и нейраминидаза — очень важные поверхностные антигены
вируса гриппа.

Роль нейраминидазы, разрушающей рецепторы к вирусу, не ясна до конца.
Предполагается, что ее активность помогает вирусным частицам проникать через
секреты слизистых, богатых сиаловой кислотой, для достижения вирионами клеток-
мишеней эпителия дыхательных путей. Также экспериментально подтверждена роль
фермента в облегчении высвобождения вновь образованных вирусных частиц с
поверхности заражённых клеток, где те могут агрегироваться в результате
взаимодействия вирусного гемагглютинина с сиаловой кислотой на мембране клетки

Кардиопротекторное

Сушка, хранение сырья

• Необходимо начать сушку вскоре после сбора, т.к.

гликозиды флавоноидов под влиянием ферментов в
присутствии влаги легко гидролизуются, с образованием
агликонов и сахарной части, а свободные агликоны при
этом могут окисляться.

• Сушка сырья естественная в тени или искусственная в

сушилках при температуре 40-60°С.

Медленная сушка, сушка на солнце может приводить к

разрушению флавоноидов.

• Хранят

сырье

в

упакованном

виде

в

сухом

проветриваемом

помещении,

без

доступа

прямых

солнечных лучей.

Флавоноиды - кристаллические вещества
белого, желтоватого, желтого, оранжевого,
красного, синего и фиолетового цвета.

• Гликозиды растворимы в воде, водно-спиртовых

смесях, в спиртах при нагревании, этилацетате и
нерастворимы в органических растворителях
(петролейном и диэтиловом эфирах, дихлорэтане,
ССl4).

• Агликоныхорошо растворимы в метиловом и

этиловом спиртах, органических растворителях
(диэтиловом эфире, ацетоне, бензоле) и в
растворах щелочей. Нерастворимы в воде.

• Гликозиды обладают оптической активностью.

Физико-химические свойства

• Флавоноиды флуоресцируют в УФ-свете: флавоны,

флавонол-3-гликозиды, флаваноны, халконы
обнаруживаются на хроматограммах в виде коричневых
пятен, флавонолы и их 7-гликозиды - в виде желтых или
желто-зеленых пятен.

• Благодаря карбонильным и фенольным –ОН группам

флавоноиды способны образовывать комплексы с
солями металловразличной степени устойчивости.

• Флавоноиды способны восстанавливатьсяатомарным

водородом в кислой средев присутствии магния или
цинка.

• Флавоноиды взаимодействуют со щелочами с

образованием фенолятов желтой окраски, которая при
нагревании изменяется до оранжевой или коричневой.

Физико-химические свойства

Качественные реакции

проводят с водными или водно-спиртовыми извлечениями

Цианидиновая проба (проба Синода) специфична!

Реакция со щелочами
Флавоны и флавонолы растворяются в щелочах с
образованием желтой окраски.

C раствором аммиака флавоны, флавононы и флавонолы
дают желтое окрашивание, при нагревании переходящее в
оранжевое и красное;
халконы и ауроны – красное, пурпурное;
антоцианы – синее, фиолетовое окрашивание.

Реакция с минеральными кислотами
При действии минеральных кислот на флавоны и флавонолы
образуются интенсивно-желтые соли аксония, а флавононы
дают соли халконов, окрашенные от ярко-оранжевого до
малинового цвета

Реакции с солями тяжелых металлов

С железа (3) хлоридом 5-гидроксифлавоны образуют
комплексы голубовато-зеленого цвета; халконы, флавонолы
и флавононолы образуют комплексы коричневого цвета.
! Реакция малоспецифична для флавоноидов!

Со свинца ацетатом (средним и основным) обнаруживаются
флавоноиды, содержащие о-дигидроксигруппу или
сочетание о-оксикарбонил с о-дигидроксигруппой. Флавоны,
халконы, ауроны со свободной гидроксильной группой в
кольце В с ацетатом свинца дают ярко-желтую окраску.

O

OH

O

O

AlCl3

O

O

Al

С алюминия хлоридом или цирконила хлоридом
флавоноиды дают окрашенные в желтый цвет комплексы,
которые флюоресцируют в УФ-свете.
Реакция является специфичной для флавоноидов, но!
достоверна только при наличии в молекуле свободных
гидроксильных групп при С-3 или С-5 и наличии
карбонильной группы при С-4.

3
5
4

Хроматографический анализ

• одномерная и двумерная хроматография на бумаге
• ТСХ (в тонком слое сорбента)

Обнаружение веществ проводят в УФ- и видимом свете, до и
после проявления хроматограмм реактивами (алюминия
хлоридом, щелочами и др.).

ФС Хвоща полевого

трава

(ГФ РФ)

Horsetail

(British Pharmacopoeia )

Количественное определение флавоноидов

в растительном сырье

Общие принципы:

• экстракцию флавоноидов из лекарственного
растительного сырья проводят этанолом различной
концентрации (40%, 70%, 95%), реже метанолом.
• полученное водно-спиртовое извлечение очищают от
балластных и сопутствующих веществ различными
способами:
а) хлороформом (цветки пижмы);
б) пропусканием через колонку с полиамидом
(плоды боярышника);
в) хроматографированием на бумаге или в тонком
слое (на пластинках).

Спектрофотометрическое определение

флавоноидов в извлечении проводят различными

способами:

а) по собственной окраске в сравнении с

Государственным стандартным образцом (ГСО)
(гиперозид, салипурпозид и др.);

б) после проведения комплексообразующей

реакции с алюминия хлоридом или хлористым
цирконилом также в сравнении с ГСО (рутин,
кверцетин, авикулярин и др.).

ЛРС, содержащее флавоноиды,

включенное в ГФ 14 РФ

Боярышник плоды, цветки
Пустырника трава
Аронии черноплодной плоды
свежие, плоды сухие
Бессмертника песчаного цветки
Пижмы обыкновенной цветки
Горца перечного трава
Горца птичьего (спорыша) трава
Горца почечуйного трава
Череды трехраздельной трава
Гинкго двулопастного листья

Корни шлемника байкальского
Плоды, бутоны софоры японской

Василька синего цветки
Зверобоя трава
Сушеницы топяной трава
Фиалки трава
Хвоща полевого трава
Стальника полевого корни
Эрвы шерстистой трава

Британская

•Agnus Castus Fruit Whole, ripe, dried fruit of Vitex agnus-castus L. кастицин флавоноид

•Agnus Castus Fruit Dry Extract

•Anemarrhena Asphodeloides Rhizome Dried, whole or fragmented, peeled or unpeeled, rhizome of Anemarrhena asphodeloides Bunge, with roots removed,

•collected in spring or autumn. mangiferin

•Processed Angelica Sinensis Root Smoke-dried, whole or fragmented root, with rootlets removed, of Angelica sinensis Minimum 0.050 per cent of trans-ferulic acid

•Artichoke Leaf Whole or cut, dried leaf of Cynaracardunculus chlorogenic acid

•Artichoke Leaf Dry Extract

•Ash Leaf Dried leaf of Praxinus excelsior L. or Praxinus angustifolia Minimum 2.5 per cent of total
hydroxycinnamic acid derivatives, expressed as chlorogenic acid

•Birch Leaf Whole or fragmented, dried leaves of Betula pendulа and/or Betula pubescens Content Minimum 1.5
per cent of flavonoids, expressed as hyperoside

•Blackcurrant Leaf Minimum 1.0 per cent of flavonoids, expressed as Isoquercitroside

•Black Currant Syrup

•Buckwheat Herb Whole or fragmented aerial parts of Fagopyrum esculentum of rutoside

•Calendula Flower Whole or cut, dried, and fully opened flowers that have been

•detached from the receptacle of the cultivated, doubleflowered varieties of Calendula officinalis Minimum 0.4
percent of flavonoids,

•Drynaria Rhizome Dried rhizome of Drynariafortunei (Kunze) J. Sm. The ramenta may be removed. Minimum 0.5
per cent of naringin

•Elder Flower Dried flowers of Sambucus nigra L.

•Fig The sun-dried succulent fruit of Ficus carica L.

•Fraxinus Rhynchophylla Bark Whole or fragmented, dried branch or trunk bark of Fraxinus

•rhynchophylla Hance, collected in spring or autumn. sum of esculin (ClsH1609;

•Mr 340.3) and esculetin

•Ginkgo Leaf

•Refined and Quantified Ginkgo

•Dry Extract

•Goldenrod Whole or cut, dried, flowering aerial parts of Solidago gigantea Aiton or Solidago canadensis

•European Goldenrod

•Goldenseal Root

•Hawthorn Berries Dried false fruits of Crataegus monogyna Iacq. (Lindm.) or

•C. laevigata (Poir.) DC. (syn. C. oxyacantha L.) or their hybrids or a mixture of these false fruits. Minimum 0.06
per cent of procyanidins

•Hawthorn Leaf and Flower

•Hawthorn Leaf and Flower Dry Extract

•Quantified Hawthorn Leaf and Flower Liquid Extract

ЛР и ЛРС,

содержащие

кумарины

Кумарины – это природные соединения, в основе
которых лежит скелет бензо-- пирона

Кумарин впервые был выделен Фогелем в 1820 г. из
плодов дерева тонко (Dipterix odorata; сем-ва Fabaceae)

Классификация

1. Собственно кумарины: кумарин, изокумарин, гликозиды
кумарина

кумарин

изокумарин

2. Фурокумарины: псорален, ангелицин

O
O

O

псорален

O
O
O

CH3

CH3

4. Бензокумарины– соединения, образовавшиеся в результате
конденсации кумарина с бензольным кольцом в положении 3,4.
5. Куместаны (куместролы)– кумариновые соединения,
содержащие систему бензофурана, сконденсированную
с кумарином в 3,4-положении.

3. Пиранокумарины

пиранокумарин

Фармакологическое действие

• Антикоагулянтное(настой травы донника, дикумарол)

• Фотосенсибилизирующее (т.е.способны повышать
чувствительность кожи к ультрафиолетовым лучам, и
поэтому находят применение в терапии витилиго.
Например, аммифурин из плодов амми большой; бероксан
из плодов пастернака посевного, псорален из плодов
псоралеи костянковой)

• Спазмолитическое

• Коронарорасширяющее(виснадин и дигидросамидин из
корней вздутоплодника сибирского, атамантин из корней
и плодов горичника горного, птериксин из порезника
густоцветного)

• Антимикробное(остхол из жгун-корня)

• Эстрогеноподобное (куместролы клевера)

Особенности заготовки

• Кумарины обладают способностью повышать

чувствительность кожи к действию УФ-лучей.

• В солнечную погоду даже незначительное

прикосновение к содержащим кумарины растениям
может вызвать ожоги.

• Поэтому, в целях соблюдения техники безопасности,

сбор сырья проводят в сухую, но не солнечную
погоду, с использованием рукавиц.

Физико-химические свойства

кумаринов

• бесцветные или слегка желтоватые кристаллические
вещества;

• хорошо растворимы в органических растворителях:
хлороформе, этиловом эфире, этиловом спирте, жирах и
жирных маслах, в водных растворах щелочей (особенно при
нагревании) за счет образования солей оксикоричных кислот;

•в воде, в большинстве случаев, нерастворимы;

• при нагревании до 100 °С возгоняются в виде игольчатых
кристаллов;

•многие кумарины проявляют характерную флуоресценцию
при УФ возбуждении в нейтральных спиртовых растворах; в
растворах щелочей и концентрированной серной кислоте в
видимой области спектра.

Качественное обнаружение

используются

• лактонные свойства;
• способность флуоресцировать в УФ-свете и

давать окрашенные растворы с
диазосоединениями;

• способность возгоняться;
• хроматографический анализ спиртовых или

хлороформных экстрактов сырья.

Количественное определение

• Способность лактонного кольца кумарина к обратному

размыканию и замыканию в зависимости от рН-среды
используется в гравиметрическом методе.

• Специфическое отношение кумаринов к щелочи лежит в

основе метода нейтрализации (обратное титрование).

• Способность кумаринов давать устойчивые красно-

оранжевые и красно-пурпурные растворы с
диазотированным сульфаниламидом в щелочной среде
используют в колориметрических методах.

•

Спектрофотометрический - основан на способности
кумаринов поглощать монохроматический свет при
определенной длине волны в зависимости от
концентрации исследуемого раствора.

•

Хромато-спектрофотометрические (хромато-оптические)

•

Полярографический - основан на восстановлении
кумаринов на ртутно-капельном электроде в альфа-
пироновом кольце по месту двойной связи в положении
3,4. Присоединяют галоген - йод, в качестве реактива
используют тетраэтиламмония йодид.

Количественное определение

ЛРС, содержащее кумарины,

включенное в ГФ 14 РФ

Донника трава




Каштана конского семена
Смоковницы обыкновенной
листья
Амми большой плоды
Амми зубной плоды
Псоралеи костянковой
плоды

Кора коричника китайского (кассия китайская)

AutomneFragrifertParfumeur

TonkaMuskAlyssaAs
hley

UnisexForEverybodyFra
granceOne

Лекарственные
растения,
содержащие

хромоны

Хромоны - это ненасыщенные гетероциклические
кетоны, относящиеся к конденсированной системе
бензо- γ -пирона.

Они образуются в
результате
конденсации γ -
пиронового и
бензольного кольца
по структуре близки
как к кумаринам,

так и к
флавоноидам.

Классификация

Фармакологические свойства

спазмолитическое действие

Физико-химические свойства хромонов

1. Кристаллические вещества.

2. Растворимость.

Агликоны растворимы в органических растворителях;

Гликозиды растворимы в водно-спиртовых растворах ив воде.

3. Флюоресценция в УФ-свете.

В УФ-свете хромоны имеют голубую, желтую, зеленовато-желтую, желто-
коричневую или коричневую флуоресценцию. (Подобной флюоресценцией
обладают кумарины и флавоноиды).

4. Реакционная способность.

На реакционную способность оказывает влияние характер заместителей:
фенольный гидроксил, альдегидная или ацетильная группы вступают в
характерные для них реакции замещения.

Для отличия хромонов от кумаринов и флавоноидов

проводят

1) реакцию со щелочью: хромоны образуют о-окси-β-дикетоны, с
безвозвратным раскрытием γ-пиранового кольца. (в этих же условиях
кумарины при подкислении раствора регинерируются в исходные
соединения, т.е. происходит рециклизация α- пиронового кольца.)

2) реакцию азосочетания: хромоны с диазореактивами на
хроматограммах не обнаруживаются, а в растворах приобретают
желтый цвет, в то время как кумарины образуют красноватую окраску.

Флавоноиды в отличие от хромонов образуют окрашенные продукты с
солями циркония, алюминия хлоридом, и дают положительную
цианидиновую пробу.

Выделение хромонов из растительного сырья

Для выделения хромонов из растительного сырья
используют экстракцию хлороформом, ацетоном,
метанолом или этанолом. Сумму фуранохромонов виснаги
морковевидной (амми зубной) извлекают кипящей водой,
чему способствуют поверхностно-активные сопутствующие
вещества.

Для очистки применяют колоночную хроматографию на
силикагеле и фракционную кристаллизацию из различных
растворителей.

Количественное определение

хромонов

• 1. Фотоэлектроколориметрический метод. Метод

используется для определения суммы хромонов в плодах
виснаги морковевидной. Получают хлороформное
извлечение, удаляют растворитель, сухой остаток
хромонов растворяют в кислоте серной и у полученного
окрашенного раствора измеряют оптическую плотность с
помощью фотоэлектроколориметра.

• 2. Хроматоспектрофотометрический

метод.Используется для определения келлина в плодах
виснаги морковевидной. Метод основан на получении
спиртового извлечения, разделении суммы хромонов
методом тонкослойной хроматографии и определении
оптической плотности элюата келлина с помощью
спектрофотометра.