L’elettroforesi su gel ha la funzione di separare

i frammenti di DNA di peso diverso

i geni virali da quelli batterici.

il plasmide dal cromosoma batterico.

le copie ottenute attraverso la PCR

Nella PCR, si usa la DNA polimerasi di Thermus aquaticus perché

è resistente alle alte temperature

commette meno errori delle altre DNA polimerasi

forma molecole di DNA più facili da analizzare.

si ottiene più facilmente e con costi molto più bassi

Quale vantaggio presentò la tecnica della PCR quando fu introdotta?

Permise di usare campioni biologici in minima quantità fornendo comunque molte copie del DNA campione

Permise di usare DNA deteriorato da campioni anche molto vecchi.

Permise di usare RNA al posto di DNA nelle indagini

Permise di identificare il DNA del campione

Due campioni di DNA provenienti da due esseri umani diversi, digeriti con diversi enzimi di restrizione e sottoposti a elettroforesi su gel,

danno luogo a bande di dimensioni diverse grazie alla presenza di RFLP diversi

danno luogo a bande identiche perché apparteniamo alla stessa specie

danno luogo a bande diverse perché ogni enzima di restrizione taglia il DNA in punti dive

danno luogo a bande identiche e perciò bisogna ricorrere alla tecnica RFLP

Il sequenziamento del DNA è utilizzato per vari scopi tranne che per

conoscere il genoma di una specie

confrontare le affinità evolutive tra specie diverse

conoscere eventuali geni difettosi in un individuo

Quale tra le seguenti affermazioni riguardanti la PCR non è corretta?

È un enzima coinvolto nel clonaggio genico

È una tecnica che permette di amplificare un gene o un genoma

È un processo che si realizza in più fasi ripetute in cicli automatizzati

È utilizzata nelle scienze forensi per individuare i colpevoli di crimini

Le librerie genomiche permettono di

identificare un clone batterico contenente un gene di interesse

scegliere un genoma che interessa al ricercatore

sequenziare il DNA di un individuo

Il cDNA corrisponde a

il filamento di DNA complementare all’mRNA sintetizzato dal gene di interesse

il DNA del gene responsabile della sintesi dell’mRNA

il filamento complementare nel DNA di un gene

Quale tra le seguenti affermazioni riguardanti un vettore plasmidico non è corretta?

Sono molecole circolari di DNA a filamento singolo

Contiene uno o più geni per la resistenza ad antibiotici

Contiene numerose sequenze di riconoscimento per gli enzimi di restrizione

È lungo poche migliaia di nucleotidi

Un enzima di restrizione

è un’endonucleasi che riconosce corte sequenze bersaglio lungo il DNA

è un’endonucleasi ottenuta dal DNA ricombinante

è un’esonucleasi che taglia il DNA rompendo il legame fosfodiestere tra due nucleotidi di un filamento bersaglio

è un’esonucleasi che accorcia il DNA bersaglio dalle estremità 5′

Con il clonaggio genico

si ottengono milioni di copie di un gene di interesse

si ottengono milioni di copie di batteri identici, ciascuno contenente un gene di interesse

si ottengono milioni di copie di uno stesso batterio

Un clone batterico ottenuto in coltura contiene un marcatore di selezione per l’ampicillina. Questo significa che

i batteri sopravvivono in presenza di ampicillina nel terreno di crescita e contengono il plasmide ricombinante

i batteri sopravvivono in assenza di ampicillina nel terreno di crescita e contengono il DNA ricombinante

i batteri non sopravvivono in presenza di ampicillina nel terreno di crescita

i batteri sopravvivono in assenza di ampicillina perché sono quelli non trattati

Quali tecniche consentono lo studio dell’espressione genica?

Western blotting, microarray, Northern blotting

PCR, Southern blotting, sequenziamento del DNA

Western blotting, Southern blotting, Northern blotting

PCR, microarray, Northern blotting

Quale delle seguenti affermazioni è falsa?

la trascrittasi inversa è una RNA polimerasi DNA dipendente

il cDNA non contiene gli introni rimossi nello splicing

la trascrittasi inversa è un enzima retrovirale

il cDNA può essere prodotto a partire dall’RNA cellulare con la catalisi della trascrittasi inversa

La trascrittomica può servire:

a confrontare quali RNA sono trascritti (e in che quantità) in condizioni fisiologiche o patologiche da uno stesso tipo cellulare, organo o tessuto

a confrontare quali RNA sono trascritti (e in che quantità) da diversi tipi cellulari, organi o tessuti di un organismo

a confrontare quali RNA sono trascritti (e in che quantità) da uno stesso tipo cellulare, organo o tessuto di organismi appartenenti a specie diverse

La tecnica del Southern blotting consente di individuare frammenti di DNA tramite

l’ibridazione con sonde formate da frammenti marcati

la capacità della carta da filtro di assorbire i frammenti di DNA

la capacità del DNA di colorarsi se trattato con specifici coloranti

l’azione specifica delle endonucleasi di restrizione

Il metodo Sanger utilizza nucleotidi

incapaci di formare il legame con la base complementare

incapaci di formare il legame fosfodiestere con i nucleotidi

tutti marcati con un fluorocromo dello stesso colore

con un atomo di ossigeno in più dei normali nucleotidi

Il DNA microsatellite è costituito da copie

ripetute in tandem per un numero variabile di volte

sempre ripetute uno stesso numero di volte

che possono essere separate tramite amplificazione

prodotte attraverso la reazione a catena della polimerasi

Il taglio con enzimi di restrizione di due campioni di DNA differente porta a risultati differenti perché avviene

in un numero di siti restrizione diverso

in corrispondenza di siti di restrizione diversi

Per produrre una molecola di DNA ricombinante occorre tagliare le due molecole da ricombinare

con lo stesso enzima di restrizione che produca estremità sfalsate

con due differenti enzimi di restrizione

con un qualsiasi enzima di restrizione, purché sia sempre lo stesso

con lo stesso enzima di restrizione che produca estremità piatte

Nella lotta alla SARS, la possibilità di sequenziamento dei genomi ha consentito di

identificare possibili bersagli proteici per vaccini o per farmaci

individuare geni umani che possono dare la resistenza alla malattia

selezionare ceppi virali meno pericolosi che contrastino quelli naturali

identificare l’agente patogeno della malattia, che è risultato essere un virus

La costruzione di una libreria genomica prevede che:

il corredo cromosomico di una cellula venga tagliato con gli enzimi di restrizione e poi duplicato più volte.

nei cromosomi della cellula di partenza vengano inseriti frammenti di DNA prelevati da altre cellule.

un patrimonio genetico venga dimezzato prima di essere sequenziato mediante apposite procedure.

a ogni gene venga assegnato un apposito marcatore radioattivo che favorisca la sua rapida individuazione.

Talvolta, alcuni geni eucariotici non vengono tradotti dai batteri in modo corretto poiché contengono introni che i batteri non sono in grado di eliminare attraverso lo splicing. Se la sequenza del gene fosse nota, sarebbe possibile sintetizzarlo e inserirlo nel batterio senza introni. In alternativa si potrebbe

convertire l’mRNA in DNA così da ottenere il gene senza introni

modificare il batterio per renderlo capace di operare lo splicing

usare sonde opportune per individuare gli introni

rimuovere gli introni usando un enzima di restrizione

Biotecnologie

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