M7 UF2 NF1 Tipus de sembres

Inòcul....

• L'inòcul és una porció de mostra que es posa en contacte amb un medi de cultiu.

• L'inòcul pot ser sòlid, líquid o gasós.

• L'inòcul sempre es realitza sobre un medi de cultiu suportat en una placa de petri.

• Quan fem una inoculació sempre hi ha un creixement de microorganismes.

Colònia...

• Una colònia és una agrupació de microorganismes de diferents tipus.

• Per expressar quantitativament el nombre de microorganismes que hi ha en una placa de petri, es parla d'UFC per volum o massa de mostra. Per exemple 100 UFC/ml mostra.

• Parlem d'un cultiu pur quan totes les colònies són iguals.

• A la indústria el que ens interessa és aconseguir cultius purs.

Estris per realitzar sembres..

• La nansa de kolle i la nansa de picadura ens permeten fer sembres que tenen com objectiu fer recompte de microorganismes.

• Per fer una sembra quantitativa necessito utilitzar una pipeta o micropipeta per conèixer el volum inoculat de la mostra.

• La nansa de digralsky permet agafar un volum de mostra per fer un cultiu quantitatiu.

• Amb la nansa de kolle es realitzen sembres per esgotament.

Si el meu objectiu és aïllar una colònia..

• hauré de fer una sembra d'estries (simple, múltiple..).

• cal fer una sembra de picadura.

• faré una sembra en slant.

• faré una sembra amb escovilló en un medi líquid.

Si vull mantenir unes colònies durant unes dues setmanes...

• basta fer una sembra d'estria simple.

• realitzaré una sembra de picadura.

• faré una sembra en profunditat.

• faré una sembra de filtració.

Per realitzar una sembra....

• S'ha de treballar en condicions asèptiques.

• Sempre que el medi de cultiu estigui esterilitzat, puc fer la sembra en una zona neta.

• Sempre s'han d'esterilitzar les nanses de sembra just en el moment de fer la sembra.

• Puc treballar a prop d'un bünsen o dintre d'una campana de flux laminar.

Si vull fer recompte de la càrrega microbiana que hi ha en una mostra....

• realitzaré una sembra en slant.

• realitzaré una sembra per filtració al buit.

• Realitzaré una sembra en profunditat per microorganismes aeròbics.

• realitzaré una sembra en superfície. Inocularé amb una micropipeta i homogeneïtzaré l'inòcul amb una nansa de digralsky.

Anàlisi quantitatiu...

• serà correcte fer el recompte en plaques de petri que tinguin entre 30 i 300 UFC.

• Si hi ha més de 300 UFC en la placa de petri, hauré de fer una o vàries dilucions de la mostra abans de tornar a fer una altra sembra.

• permet saber quina contaminació microbiana té una mostra.

La sembra per filtració per membrana...

• s'utilitza per realitzar una anàlisi microbiana qualitativa.

• s'utilitza per analitzar mostres sòlides.

• es pot realitzar en una rampa de buit.

• té un protocol per fer el recompte de les UFC, depenent del nombre de colònies que hi hagi als quadradets del filtre, es farà un recompte total o estimat.