Bakterioloģiskā izmeklēšana

Atšķirto sivēnu grupai enterīts (caureja, vemšana, slikta apetīte, neliels drudzis, tūska). Veterinārsts ieguva fēču paraugu, piepildīja līdz malām sterilu plastmasas konteineru (15mL), ievietoja hermētiski noslēgtā plastikāta maisā un pāris stundu laikā transportējot 4-8 grādu temperatūrā nogādāja laboratorijā izmeklēšanai uz nosacīti patogēno mikrobiotu. Aizdomu diagnoze - Yersinia spp. Ar kādu metodi šajā 1. izmeklēšanas dienā paraugs laboratorijā tika uzsēts uz primārās izolēšanas barotnēm?

• Piliena metode

• Modificētā švīkājuma metode

• Golda metode

• Zāliena tehnika

• Nospieduma tehnika

Kāda(-s) barotne(-s) tika izvēlētas primārā parauga uzsēšanai?

• Asins agars

• Barojošais agars

• Vismaz AA un BA

• AA, BA un selektīvā barotne CIN agars

Pirmajā izmeklēšanas dienā paraugs modificētā švīkājuma tehnikā tika uzsēts uz 2 AA, viena BA un viena CIN agara. Viena AA un BA plate tika inkubētas aerobi 37 oC 24h ilgi, bet otra AA plate un CIN agara barotne tika kultivētas 30 oC 24h.

Izmeklēšanas 2. dienā uz AA un BA tika iegūtas attēlā redzamajai līdzīgas jauktas audzes. Arī uz CIN agara koloniju audze nebija pilnīgi vienveidīga, tomēr dominējošās kolonijas bija raksturīgas Yersinia spp.

Kā tika veikta iespējamā patogēnā ierosinātāja identificēšana?

• Izvērtējot koloniju morfoloģiju.

• Nosakot audzes krāsu, smaržu, koloniju reljefu, caurspīdīgumu u.c. koloniju morfoloģiskās pazīmes.

• Nosakot koloniju vienveidīgumu, masveidīgumu, morfoloģiju, skaitu, izmēru un hemolīzi.

Ar kādu metodi tika pārsētas aizdomīgās kolonijas tīrkultūras izolēšanai?

• Piliena metode

• Modificētā švīkājuma metode

• Golda metode

• Zālienveida švīkājuma tehnika

Izmeklējumu 3. dienā bija iegūta tīrkultūra uz CIN agara un BA. Kāda bija laboratorijas speciālista turpmākā secīgā rīcība?

• 1) Krāsošana pēc Grama metodes 2) Bioķīmisko eksprestestu veikšana 3) Identifikācija ar kādu no kompleksajām bioķīmiskajām identifikācijas sistēmām vai masspektrometrijas analīzēm 4) Antibiogrammas veikšana

• 1) Antibiogrammas procedūra 2) Bioķīmisko eksprestestu veikšana 3) Krāsošana pēc Grama metodes 4) Identifikācija ar kādu no kompleksajām bioķīmiskajām identifikācijas sistēmām vai masspektrometrijas analīzēm

• 1) Pārsēšana uz jaunām barotnēm 2) Mikroskopija pēc Grama

Ar kādu metodi izolētā tīrkultūra tika uzsēta uz MHA antibiogrammas veikšanai ar disku difūzijas metodi?

• Piliena metode

• Modificētā švīkājuma metode

• Golda metode

• Zāliena tehnika

• Nospieduma tehnika

Uz CIN agara raksturīgās kolonijas bija vidēji lielas, ar tumši sarkanu centru un caurspīdīgu perifēriju. Uz AA un BA 1-3mm lielas, pelēcīgas, spīdīgas kolonijas bez hemolīzes. Mikroskopējot pēc Grama metodes, redzēja gramnegatīvas 0,5-0,8x1-3μm lielas nūjiņas ar bipolāru krāsojumu. Visi izvērtētie parametri norādīja uz izolētās kultūras piederību Yersinia enterocolitica, un šo sugu apstiprināja ar MALDI-TOF masspektrometrisko analīzi.

Lai izslēgtu kapsulu esamību, kādu metodi krāsošanai būtu jāpielieto?

• Šēfera-Fultona

• Cil-Nilsena

• Hisa

• Vienkāršo

Yersinia spp. ir bioķīmiski samērā mazaktīvas. Katalāze, ureāze, MR tests pozitīvi. Oksidāze, laktoze, citrāti, sērūdeņradis, VP tests un lizīna dekarboksilāze negatīvi. Indola reakcija Y.enterocolitica ir variabla – var būt pozitīva 50% no izolātiem. Y.enterocolitica raksturīgā hemolīze redzama attēlā. Kāda tā ir?

• alfa

• beta

• gamma

• delta