Recuento e identificación de microorganismos

El recuento de microorganismos se puede realizar

• todas son corrrectas

• solo si son viables

• Midiendo el número de individuos

• Solo de manera indirecta

La determinación del peso húmedo:

• Es una medida de recuento indirecto
• Presenta grandes errores
• Se realiza mediante desecado en estufa
• Se hace en una ultracentrífuga

La técnica de micro Kjeldahl

• Se usa para cuantificar la cantidad de proteínas
• Se usa para cuantificar la cantidad de N
• Se usa para cuantificar la cantidad de ácidos nucléicos
• Es un método de recuento de individuos

El espectrofotómetro

• Da una medida de absorbancia

• Todas son correctas

• Da una medida de fluorescencia

• Hace incidir una longitud de onda sobre el flujo de células

Marca la falsa

• A mayor número de microorganismos, mayor absorbancia
• La escala McFarland es la recta patrón en el espectrofotómetro
• A mayor número de microorganismos, menor absorbancia
• La escala de McFarland consta de 10 estándares

El citómetro de flujo:

• Tiene un detector de fluorescencia
• Sirve para cuantificar células sanguineas, exclusivamente
• A mayor fluorescencia detectada, mayor recuento de microorganismos
• La escala McFarland es la recta patrón en el citómetro

Las cámaras de recuento:

• Petronelli y Newbaer
• Permiten expresar el resultado en UFC/mL
• Se usan para recuento de microorganismos sin necesidad de microscopio
• Cuentan con una cuadrícula que facilita el recuento

Células viables

• Se recuentan siempre sembrando en la superfice de una placa
• Se recuenta el el microscopio
• Célula capaz de dividirse originando descendencia
• Su recuento no es muy usado en agua, alimentos ni suelo

Tras una siembra en profundidad, he contado 100 UFC en la 1/100

• No es estadísticamente significativo
• No puedo usar el recuento de esa placa
• 10^3 UFC/mL
• 10^4 UFC/mL

UFC

• sinónimo de células viables
• corresponde a una bacteria
• sobreestima el número de individuos
• corresponde mínimo a una bacteria, pero puede corresponder a más