Laboratorio 2 de bioquimica

UNA PROPIEDAD CINÉTICA DE LAS ENZIMAS ALOSTERICAS HOMOTROPICAS ES QUE

• Incrementos pequeños en la actividad del sustrato produce incrementos grandes en la velocidad inicial

• No existen interacciones cooperativas entre subunidades proteicas

• La grafica de su curva saturacion es sigmoidea

• Siguen la cinetica de Michaelis-Menten

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Este tema se explica en la clase numero 6: Enzima II:

"La mayoría de enzimas alostéricas dan lugar a una curva de saturación SIGMOIDEA cuando se presenta V frente a [S]"

EL REACTIVO 2 (R2) DE LA PRACTICA DE SU LABORATORIO CONTIENE

• L-alanina

• NADH

• Buffer 7.4

• LDH

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Lease la base teorica del lab: "R2 o substrato: -NADH 0.18mmol/L"

EN CUAL DE LAS SIGUIENTES PATOLOGÍAS SE OBSERVAN INCREMENTOS MARCADOS DE ALT

• Hepatopias con lesion hepato celular

• Embolia pulmonar

• Cirrosis biliar

• Infarto agudo del miocardio

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Base teorica de laboratorio numero 2: "La aplicación clínica de los ensayos para ALT está dirigidos principalmente a la evaluación de las hepatopatías. Se observa incrementos en lesión hepatocelular mucho más aumentada que en alteraciones obstructivas tanto intrahepáticas como extrahepáticas.

LA CLASE DE ENZIMAS QUE CATALIZA LA FORMACIÓN DE ENLACES C-C, C-S, C-O, C-N MEDIANTE REACCIONES DE CONDENSACIÓN ACOPLADA A ATP SON

• Isomerasas

• Liasas

• Ligasas

• Transferasas

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Clase 5, enzima I: "Ligasas: catalizan la unión, o ligadura de dos moléculas en reacciones acopladas a la hidrolisis de la ATP"

O tambien de esta manera: "Ligasas: enzimas que catalizan la unión (ligadura) de dos moléculas en reacciones acopladas a la hidrólisis del ATP.

UNA CARACTERÍSTICA DE LA REACCIÓN CATALIZADA POR LA ALT ES

• Se forma oxalacetato

• El alfa-cetoacido es el donador de grupos amino

• El alfa-cetroglutarato es el aceptor de grupos amino

• Se produce una desaminacion neta (perdida de grupos amino)

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De san gugul: "La ALT cataliza específicamente la transferencia del grupo amino del la alanina para el cetoglutarato, con formación de glutamato y piruvato. El piruvato se reduce a lactato por acción de la lactato deshidrogenasa (LDH), en tanto que la coenzima NADH se oxida a NAD."

Y tambien teoria del lab: "En estas reacciones, el grupo

α-amino se transfiere al átomo de carbono α del α-cetoglutarato, dejando

el correspondiente α-cetoácido análogo del aminoácido."

EL MECANISMO BIOQUÍMICO POR EL CUAL EL PH NO OPTIMO DE UNA ENZIMA DISMINUYE SU ACTIVIDAD CATALÍTICA ES

• Hay perdida de interacciones hidrofobicas

• Aumenta la concentracion de la enzima

• Existe destruccion de puentes salinos

• Por alteracion de sus cargas

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Clase 6 de referencia, para mejor explicacion en la bibliografia subida al drive: "Concentracion del pH"

EN LA CATÁLISIS ENZIMÁTICA LA COENZIMA PIRIDOXALFOSFATO ES PORTADOR TRANSITORIO DEL SIGUIENTE GRUPO QUÍMICO

• Formilo

• Amino

• Acilo

• Aldehido

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De referencia leerse la teoria del lab: "El grupo prostético es el Piridoxal fosfato

(PLP), forma coenzimática de la Piridoxina o vitamina B6, este funciona

como un transportador intermedio de grupos amino en el sitio activo de la

ALT."

DE ACUERDO A LA GRAFICA DE LA ECUACION DE MICHAELIS-MENTEN Km SE DEFINE COMO

• Es la Vo cuando alcanza la mitad de la V maxima

• Concentracion de sustrato a la cual se alcanza la V maxima

• Concentracion de sustrato a la cual la Vo es la mitad de la V maxima

• Concentracion de producto a la cual la Vo es la mitad de la V maxima

Answer explanation

Clase 6: enzimas II: "𝐾𝑀 es la concentración de sustrato a la cual la 𝑉0 es la mitad de la 𝑉𝑀á𝑥 alcanzable a una concentración particular de enzima"

                                                                                                                                  

SEGUN EL FUNDAMENTO DEL METODO LA MEDICION DE LA ABSORBANCIA EN LA DETERMINACION FOTOMETRICA LA CUAL ES PROPORCIONAL A LA CONCENTRACION CATALITICA DE ALT EN LA MUESTRA ES

• La formacion de glutamato

• la transferencia reversible del grupo amino al alfa-cetoglutarato

• Velocidad de disminucion de NADH en el medio

• El piruvato reducido a lactato

Answer explanation

Teoria del lab 2: "PRINCIPIO DEL MÉTODO

La alanina aminotransferasa (ALT) inicialmente llamada transaminasa

glutámico pirúvica sérica (SGPT) cataliza la transferencia reversible de un

grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato con formación de glutamato

y Piruvato. El Piruvato producido es reducido a lactato en presencia de

lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH, sin activación por Piridoxal fosfato.

La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio,

determinado fotométricamente es proporcional a la concentración

catalítica de ALT en la muestra ensayada."

UNA ENZIMA QUE SE REGULA O SE ACTIVA POR PROTEOLISIS IRREVERSIBLE A PARTIR DE UN PRECURSOR INACTIVO ES

• HMG-CoA reductasa

• Treonina deshidratasa

• Tripsina

• Aspartato transcarbamoilasa

Answer explanation

Leer de referencia bibliografia de la clase numero 7 y su clase para comprender con exactitud