biotechnologia

Cząsteczka DNA posiada ujemnie naładowane reszty fosforanowe, dzięki którym w żelu przemieszcza się w kierunku elektrody dodatniej. Jest to wykorzystywane podczas procedury:

• elektroferezy do oddzielenia fragmentów DNA o różnej długości - dłuższe poruszają się wolniej.

• elektroferezy do oddzielenia fragmentów DNA o różnej długości - dłuższe poruszają się szybciej.

• PCR do rozdzielenia dwóch nici DNA

• PCR do rozdzielenia fragmentów DNA o różnej długości

Łańcuchowa reakcja polimerazy to:

• przecinanie DNA w ściśle określonych miejscach

• rozdzielanie cząsteczek o różnych właściwościach

• powielanie wybranego fragmentu DNA z udziałem polimerazy DNA

• ustalanie kolejności nukleotydów w DNA

Do wycięcia potrzebnego genu z genomu dawcy wykorzystuje się:

• enzymy restrykcyjne
• skalpel
• elektroforezę
• enzymy ligazy

Enzymy używane w bioinżynieri to m.in.:

A) ligaza DNA

B) polimeraza DNA

C) enzymy restrykcyjne

Określ jakie reakcje katalizują:

• A,B- tworzenie wiązań glikozydowych

  C - rozcinanie wiązań glikozydowych

• A - tworzenie wiązań fosfodiestrowych

  B- tworzenie wiązań glikozydowych

  C - rozcinanie wiązań wodorowych

• A,B- tworzenie wiązań fosfodiestrowych

  C - rozcinanie wiązań fosfodiestrowych

• A - rozcinanie wiązań fosfodiestrowych

  B- tworzenie wiązań fosfodiestrowych

  C - rozcinanie wiązań wodorowych

Podaj nazwę wiązań występujących w cząsteczce DNA, które są rozrywane podczas replikacji przy udziale helikazy, oraz nazwę czynnika, który powoduje ich rozerwanie podczas przebiegu PCR.

(a)  

Biblioteka DNA stanowi zbiór fragmentów DNA danego organizmu włączonych do cząsteczek wektorów i wprowadzonych najczęściej do komórek bakterii lub drożdży. Wyróżnia się dwa rodzaje bibliotek DNA – genomowe oraz cDNA. Biblioteki cDNA tworzone są wg informacji zawartej w mRNA.

Podaj nazwę rodzaju enzymu katalizującego proces 1) trawienia DNA 2) syntezy cDNA:

• 1) enzym restrykcyjny

  2) polimeraza RNA

• 1) ligaza

  2) polimeraza RNA

• 1) sonda molekularna

  2) odwrotna transkryptaza

• 1) enzym restrykcyjny

  2) odwrotna transkryptaza

Hybrydyzacja to zjawisko spontanicznego parowania się zasad pochodzących z różnych nici kwasów nukleinowych. Wykorzystuje się je np. do wykrywania konkretnej sekwencji zasad DNA dzięki hybrydyzacji ze specjalnie oznaczonym fragmentem DNA. Określ, jak nazywa się ten fragment i krótko opisz jeden ze sposobów jego wyznakowania.

(a)  

Wyjaśnij różnicę pomiędzy lepkimi i tępymi końcami DNA utworzonymi przez enzymy restrykcyjne.

(a)  

Załóżmy, że właśnie wykonałeś reakcję PCR, otrzymując wiele kopii docelowego fragmentu DNA. A może wykonałeś klonowanie DNA, próbując „wkleić” gen do okrągłego plazmidu DNA .

Teraz chcesz sprawdzić, czy twój PCR zadziałał lub czy twój plazmid ma odpowiedni gen. Jakiej techniki możesz użyć do wizualizacji (bezpośredniej obserwacji) fragmentów DNA?

• kolejnej sekwencji PCR

• eletrofereza z żelem wybarwianym barwnikiem wiążącym DNA

• selekcji antybiotykiem

• skaningowy mikroskop elektronowy