MT-V - Quiz 10-11

Welchen Vorteil haben interkalierende Farbstoffe gegenüber Hydrolyse-Sonden?

• präzisere Analysen

• Schmelzkurvenanalyse möglich

• mehrere Amplifikationskurven

• schnellere Analysen

Welche Vorteile haben Hydrolyse-Sonden gegenüber interkalierenden Farbstoffen?

• Nebenprodukte geben kein Fluoreszenzsignal

• Multiplexing

• schnellere Amplifikation

• höhere Fluoreszenzwerte

Was ist der FRET in der real-time PCR?

• Energietransfer vom Reporter zum Quencher

• Energietransfer vom Quencher zum Reporter

• Energietransfer vom Quencher zum Gerät

• freiwerdende Energie wenn das Elektron auf das ursprüngliche Energieniveau zurückfällt

Was benötigt man für eine absolute Quantifizierung in der real-time PCR?

• Standards mit bekannter Konzentration

• Proben mit bekannter Konzentration

• Sonden mit unterschiedlichen Farbstoffen

• spezielle DNA-Polymerasen für die Quantifizierung

Wie kann ich in der real-time PCR (qPCR) testen, ob meine extrahierte Probe PCR-Inhibitoren enthält?

• Proben-DNA in der qPCR unverdünnt und verdünnt messen

• Proben-DNA photometrisch messen

• Proben-DNA fluorimetrisch messen

• Schmelzkurvenanalyse machen

Was ist der Cq-Wert?

• Schnittpunkt der Amplifikationskurve mit dem Threshold

• Schnittpunkt der Amplifikationskurve mit der Baseline

• Schnittpunkt der Amplifikationskurve mit der y-Achse

• maximaler Fluoreszenzwert in der Plateau-Phase

Welche Nachteile hat die real-time PCR im Vergleich zur konventionellen PCR?

• Größe der PCR-Produkte kann nicht direkt detektiert werden

• es können nur kleine DNA-Fragmente vervielfältigt werden

• dauert länger als die konventionelle PCR

• ist weniger präzise als die konventionelle PCR

Was ist ein Unterschied der digitalen PCR zur real-time PCR?

• Reaktionsmix wird auf viele Einzelreaktionen aufgeteilt

• Es werden immer mehrere Sonden verwendet

• Die digitale PCR läuft schneller

• Es werden immer mindestens 4 Primer verwendet

Welche Vorteile hat die digitale PCR im Vergleich zur real-time PCR?

• Man braucht keine Standards für die Quantifizierung

• Sie ist weniger anfällig für PCR-Inhibition

• Man kann quantitativ messen

• Man kann qualitativ messen

Was haben die real-time PCR und die digitale PCR gemeinsam?

• Man kann interkalierende Farbstoffe und Hydrolyse-Sonden nutzen

• Man kann eine Schmelzkurvenanalyse machen

• Der Verlauf der PCR ist für das Messergebnis entscheidend

• Man kann qualitative und quantitative Messungen durchführen