Eletroforese e Hibridização

A técnica de eletroforese é amplamente utilizada para a separação de moléculas carregadas. Com base alternativas abaixo sobre esta técnica está correta?

• O DNA e outras moléculas ficam estáticas no gel facilitando a visualização dos fragmentos de peptídeos

• As moléculas menores migram mais lentamente do que as maiores no gel.

• A eletroforese utiliza uma corrente elétrica para separar moléculas como proteínas e ácidos nucleicos com base na carga elétrica e no tamanho molecular.

• O gel utilizado na eletroforese impede completamente a movimentação das moléculas.

É um tipo de componente utilizado para o preparo do gel na eletroforese:

• Peptona

• Agarose

• Lugol

• Iodeto

Para que servem os tampões utilizados na eletroforese?

• Facilitar a migração das moléculas, mantendo um ambiente estável e condutor para a corrente elétrica.
  

• Corar as amostras para facilitar sua visualização durante o experimento.

• Impedir a separação das moléculas, tornando o processo mais lento.

• Alterar o tamanho das moléculas para que todas migrem à mesma velocidade no gel.

O método de Western Blotting é utilizado para:

• Separação e detecção de ácidos nucleicos após eletroforese.

• Imunodetecção de proteínas após separação por eletroforese e transferência para uma membrana.

• Amplificação de fragmentos de DNA por reação em cadeia da polimerase (PCR)

• Visualização de células em cortes histológicos por coloração com hematoxilina e eosina.

No método de Western Blotting, qual técnica é utilizada para o fracionamento das proteínas antes da transferência para a membrana?

• Eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE).

• Reação em cadeia da polimerase (PCR).

• Cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC).

• Espectrofotometria de absorção UV-Vis.

No processo de detecção de uma proteína específica no Western Blotting, qual é o papel do anticorpo primário?

• Marcar diretamente a proteína de interesse com uma coloração fluorescente.

• Facilitar a migração da proteína pelo gel durante a eletroforese.

• Romper a membrana para permitir a passagem da proteína.

• Reconhecer e se ligar a um epítopo da proteína de interesse, permitindo sua detecção por meio da formação do complexo antígeno-anticorpo.

No método de Western Blotting, qual é a principal função do anticorpo secundário?

• Se ligar diretamente à proteína de interesse, permitindo sua detecção imediata.

• Ampliar o sinal de detecção ao se ligar ao anticorpo primário e permitir a visualização da proteína alvo.

• Facilitar a separação das proteínas durante a eletroforese em gel.

• Desnaturar a proteína para que ela possa ser identificada na membrana.

O processo de hibridização consiste na:

• Separação de moléculas de DNA por tamanho em um gel de poliacrilamida.

• Amplificação de fragmentos de DNA por reação em cadeia da polimerase (PCR).

• Verificação da formação de pareamento de bases entre fitas com sequências complementares.

• Degradação de sequências de RNA por ação enzimática.

No processo de hibridização, as sondas são utilizadas para:

• Quebrar as ligações entre as fitas de DNA e impedir a hibridização.

• Identificar sequências específicas de ácidos nucleicos por meio do pareamento de bases complementares.

• Ampliar moléculas de DNA por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR).

• Catalisar reações químicas que removem sequências indesejadas de RNA.

A Hibridização in situ (HIS) é uma técnica utilizada em biologia molecular para análise de ácidos nucleicos em células ou tecidos. Qual o principal objetivo do uso dessa técnica?

• Identificar sequências específicas de DNA ou RNA mantendo a estrutura celular preservada.

• Analisar a expressão gênica em tempo real.
• Identificar a sequência de aminoácidos em proteínas.
• Determinar a estrutura tridimensional de uma célula.