Câu hỏi về Realtime PCR và PCR

Trong Realtime PCR, nếu dùng Taqman probe thì bước chụp hình tín hiệu huỳnh quang được thực hiện khi nào:

• Giai đoạn biến tính

• Giai đoạn kéo dài chuỗi

• Giai đoạn gắn mồi

• Tại chu kì cuối cùng

Trong phản ứng PCR (Polymerease Chain Reaction) ở giai đoạn biến tính:

• Liên kết giữa bazơ nitơ và đường deoxyribose bị phá hủy

• Liên kết giữa acid phosphoric và phân tử đường bị phá hủy

• Liên kết hydro giữa hai chuỗi AND bị phá hủy

• Liên kết phosphodieste giữa nucleotit bị đứt gãy

Trong tách chiết ARN, chất nào sau đây được dùng để phá màng và ức chế enzym ARNase

• Phenol và Chloroform

• Protease K

• Muối NaCl

• Muối Guanidium

Ion Mg2+ có tác dụng gì trong phản ứng PCR:

• Thúc đẩy bắt cặp của mồi với mạch khuân và hoạt động enzym AND polymerease

• Ngăn chặn hoạt động cắt AND của enzym ADNase

• Duy trì pH của dung dịch phản ứng PCR

• Giúp tăng nhiệt độ trong giai đoạn biến tính

Trình tự promoter ( vùng khởi động) thường nằm ở vị trí nào trên cấu trúc gen của sinh Prokaryote và Eukaryote:

• Giữa các đoạn intro và exon

• Sau vùng kết thúc phiên mã

• Trong vùng ADN điều khiển

• Trong vùng ADN mang mã di truyền

Điểm khác biệt về thành phần phản ứng trong ống real time PCR so với ống PCR chuẩn là:

• Có chất phát huỳnh quang

• Có dung dịch đệm, Ion Mg2+

• Có enzym AND polymerease

• Có mồi

Điểm khác biệt quan trọng giữa phương pháp Realtime PCR và PCR thường là:

• Realtime PCR có thể định lượng được số lượng bản ADN trong mẫu bệnh

• Realtime PCR có thể xác định sự có mặt của các tác nhân gây bệnh

• Phương pháp Realtime PCR có thể phát hiện đột biến gen

• Phương pháp Realtime PCR được thực hiện nhanh hơn

Trong phản ứng PCR, sợi ADN mới được tổng hợp theo chiều:

• 5'-3' của mạch khuôn

• 3'-5' của mạch mới

• 5'-3' của mạch mới

• Cả chiều 5'-3' và 3'-5'

Phương pháp PCR lồng được sử dụng trong trường hợp nào sau đây:

• Mẫu chứa tạp chất

• Phát hiện genotyp

• Mẫu (temple) là ARN

• Mẫu chứa ít bản copy

Ngoài chức năng sao chép, các enzym ADN polymerease còn có chức năng nào sau đây:

• Khởi động quá trình phân chia tế bào

• Khử độc và loại bỏ nhiều hóa chất gây độc

• Nối các đoạn Okazaki

• Cắt ADN, loại bỏ sai sót xảy ra trong quá trình sao chép