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Technique ELISA

Total questions: 12

Worksheet time: 9mins

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1.

Que signifie le terme ELISA ?

a)

Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay

b)

Test d'immuno-absorption par enzyme liée

c)

Enzyme Linked Immuno-Solution Assay

d)

Enzyme linked Immunological Solvant Assay

2.

Quels sont les différents types d'ELISA ?

a)

Direct ELISA

b)

Competitive ELISA

c)

Indirect ELISA

d)

Sandwich ELISA

e)

Double ELISA

3.

Quel schéma représente le principe d'une ELISA indirecte ?

a)
b)
c)
d)
4.

Cochez les points critiques de la méthode ELISA

a)

Mise en température des réactifs

b)

Temps et température d'incubation

c)

Sensibilité de la solution de substrat à la lumière

d)

Nettoyage des locaux

e)

Qualité des lavages

5.

Quelles sont les causes possibles d'un bruit de fond élevé ?

a)

Température d'incubation incorrecte

b)

Lavage insuffisant

c)

Pas assez d'anticorps utilisés

d)

Substrat exposé à la lumière

6.

Quelles sont les causes d'un faible signal ELISA ?

a)

Mauvais stockage des réactifs

b)

Lavage insuffisant

c)

Anticorps stockés à 4°C pendant plusieurs semaines ou soumis à des cycles répétés de gel/dégel

d)

Pas assez d'anticorps utilisés

e)

Puits endommagés par une pipette ou des pointes de lavage.

7.

Quelles sont les causes probables de répliques incohérentes en ELISA ?

a)

Pas de fixation de l'anticorps de capture sur la plaque

b)

Mauvais scellage de la plaque causant des intercontaminations

c)

Lavage insuffisant

d)

Substrat exposé à la lumière

8.

Dans quels cas mes résultats ne sont pas validés ?

a)

Le MRI sort de la borne haute pour la deuxième fois de suite

b)

La DO moyenne des témoins positifs et la valeur du MRI ne sont pas conformes

c)

Les témoins négatifs ne sont pas conformes

d)

Le CV de répétabilité du témoin positif n'est pas conforme

9.

Que dois je faire si la valeur de mon MRI est comprise entre 2 et 3 écarts types ?

a)

J'identifie les valeurs proches du seuil et je vérifie le statut des échantillons. S'ils sont susceptibles de changer de statut je ne les valide pas.

b)

S'il s'agit d'un point isolé, je ne change pas de lot de MRI

c)

Je valide la plaque

d)

Je ne valide pas la plaque

10.

Que dois je faire si la valeur de mon CV de répétabilité est compris entre 10% et 20% et que mon MRI est conforme ?

a)

Je calcule l'index des échantillons proches du seuil avec chaque témoin positif. Si le statut est identique, je valide la plaque

b)

Je calcule l'index des échantillons proches du seuil avec chaque témoin positif. Si le statut est différent, je ne valide pas la plaque

c)

Je calcule l'index du MRI avec l'un et l'autre des témoins. Si le MRI est conforme, j'examine le statut des échantillons proches du seuil. S'il n'est pas conforme je ne valide pas la plaque

d)

Je calcule l'index du MRI avec l'un et l'autre des témoins. Si le MRI n'est pas conforme, je ne valide pas la plaque

e)

Je ne valide pas la plaque

11.

Que dois je faire pour valider un nouveau lot de kit ?

a)

Je valide le kit lors de sa première utilisation en examinant le résultat des témoins et du MRI

b)

Je vérifie que ce lot est validé par le LNR. Si oui, j'analyse 10 fois le MRI sur ce nouveau lot et je vérifie que la moyenne est comprise dans la carte de contrôle

c)

Je vérifie que ce lot est validé par le LNR. S'il ne l'est pas, j'analyse 20 fois le MRI sur ce nouveau lot et je vérifie que la moyenne est comprise dans la carte de contrôle

d)

Je vérifie que ce lot est validé par le LNR. S'il ne l'est pas, je refuse le kit et je le renvoie au fournisseur. J'ouvre une fiche de non conformité

e)

Je vérifie que ce lot est validé par le LNR. S'il ne l'est pas, j'analyse 20 fois le MRI sur ce nouveau lot et je vérifie que la moyenne est comprise dans la carte de contrôle. Dans le cas contraire, je recaractérise la valeur du MRI avec ce nouveau lot

12.

Que dois je faire à réception d'un nouveau lot de kit ELISA ?

a)

Je vérifie la version de la notice. Je vérifie la DLC. Je vérifie le certificat de conformité et que le kit est validé par le LNR puis je valide techniquement le kit.

b)

Je vérifie la DLC. Je vérifie le certificat de conformité et que le kit est validé par le LNR

c)

Je vérifie juste que l'emballage n'est pas détérioré.

d)

J'utilise le kit immédiatement

e)

Je vérifie son emballage et le certificat de conformité. Je peux ensuite utiliser le kit