Linus Pauling & Robert B. Corey

James D. Watson & Francis H. C. Crick

Howard Temin & David Baltimore

Maurice Wilkims & Rosalind Franklin

Tế bào prokaryote tìm thấy ở động vật, cây, nấm, nguyên sinh động vật

Prokaryote chỉ chứa 1 phân tử DNA vòng trong tế bào chất

Tế bào eukaryote có nhiều nhân thật, là nơi vật liệu di truyền bao bọc bởi màng nhân

DNA eukaryote là mạch vòng, phức tạp hơn với protein histone

Gene là một đoạn DNA ngắn

Allele là một biến thể của trình tự DNA tại một locus. Mỗi allele được thừa kế từ bố và mẹ

Gene trội là một cặp allele trong đó 1 allele che tác dụng của allele còn lại khi hiện diện ở trong cùng một tế bào

Hầu hết các gene bao gồm các trình tự mã hoá ngắn

cấu trúc vòng đôi (A và G)

cấu trúc vòng đơn (G và C)

Cấu trúc vòng đơn (C và T)

Cấu trúc vòng đôi (A và T)

DNA và RNA là các chuỗi polyme dài của nucleotide

DNA gồm các loại nucleotide khác nhau ở nitrogenous base: A, G, C, T, U

G = 19,9%, C = 18,8%

A = 30,9%, T = 29,4%

RNA: uracil được thay thế bằng thymine

DNA

RNA

DNA & RNA

Protein

Hệ gen học chức năng: nghiên cứu chức năng của số lượng lớn các gen

Phiên mã học nghiên cứu về bản sao

Protein học nghiên cứu về tập hợp các protein được biểu hiện trong một sinh vật ở bất kỳ thời điểm nào

Hệ gene học chức năng gồm phiên mã học và protein học

Nghiên cứu

Chẩn đoán

Lâm sàng

Thiết kế thuốc

Đc tạo nên từ 3 thành phần chính

Mang năng lượng riêng cho từng phản ứng tổng hợp DNA

Là vật liệu di truyền

Liên kết nhau thành acid nucleic

Paramyxoviridae

Adenovirus

Picornaviridae

Arenavirus

DNA tự sao chép sau khi phân bào (cell division)

DNA đóng vai trò mạch khuôn nhờ DNA polymerase

Xảy ra ở pha S của chu trình tế bào prokaryote

DNA polymerase có hoạt tính kiểm tra và sửa sai nếu có 1 base không phù hợp gắn vào

DNA polymerase chỉ tổng hợp theo hướng 3’ —> 5’

Mạch dẫn đầu 5’ được tổng hợp mạch bổ sung 3 —> 5’ liên tục hướng vào chạc ba sao chép

DNA polymerase chỉ tổng hợp theo hướng 5’ —> 3’

Mạch chậm tổng hợp 1 cách không liên tục theo hướng ngược với chạc ba sao chép

DNA polymerase I

DNA polymerase II

DNA polymerase alpha

DNA polymerase beta

DNA polymerase II

DNA polymerase III

DNA polymerase alpha

DNA polymerase beta

Trình tự xác định hướng hoạt động của RNA polymerase

Có trình tự DNA chuyên biệt liên kết DNA polymerase bắt đầu phiên mã

Ở prokaryote, hộp Pribnow với trình tự đồng nhất TATA

Ở eukaryote, gần đầu 5’ của gene, nhận diện bởi RNA pol III

RNA poly I & III: không cần cấu trúc kẹp tóc

RNA poly II: không cần trình tự đặc biệt

RNA poly III: chuỗi pre-mRNA sẽ được cắt ra khỏi chuỗi RNA khi quá trình phiên mã kết thúc

RNA poly III: enzyme Rat1 gắn vào đầu 3’ đi đến vị trí RNA polymerase —> huỷ RNA kết thúc phiên mã

Gắn mũ

Cắt - ghép

Thêm đuôi poly A

Sửa sai

Không nhạy

Nhạy

Bị ức chế ở ĐV bậc cao

Không có ở nấm và côn trùng

1

2

3

4

mRNA

aminoacylated tRNA

rRNA

ribosomal proteins

2% : <100bp

2.5% >200bp

1.5% >200bp

2.5%: 100-200bp

TRIS giúp duy trì pH ổn định

Cho thêm EDTA để liên kiết peptide

TBE: Phổ biến nhất, DNA < 4kbp, điện thế thấp

SB: DNA > 5kbp cho hiệu quả tốt

Methylene blue

Syber safe

Xylene cyanol

Orange G

Ficoll

Glycerol

Sucrose

Glucose

quá nhiều DNA nạp vào gel

Bước sóng quan sát k phù hợp

Nhiễm protein

Điều kiện điện di k phù hợp

1990

1989

1991

1992

Ly giải protein

Biến tính và tủa protein

Tách DNA/pha lỏng

Ly trích và tinh khiết DNA