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PCR y Secuenciación

Total questions: 10

Worksheet time: 5mins

Name
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Date
1.

Flujo de trabajo de Sanger Original

a)

Desnaturalización, Revelado, Hibridación, Extensión, Electroforesis

b)

Desnaturalización, Hibridación, Extensión, Incorporación de ddNTPs, Revelado

c)

Desnaturalización, Hibridación, Extensión, Incorporación de ddNTPs, Electroforesis, Revelado

d)

Desnaturalización, Electroforesis, Extensión, Incorporación de ddNTPs, Hibridación, Revelado

2.

Paso de la PCR en el que se incorporan los dNTPs

a)

Desnaturalización

b)

Alineamiento

c)

Elongación

3.

Diferencia entre un dNTP y un ddNTP.

a)

Ausencia de OH en 2'

b)

Ausencia de OH en 3'

c)

Ausencia de OH en 5'

d)

Ausencia de PO4

4.

Para la secuenciación Sanger original que se representa en la imagen, ¿Cuáles serán las bases anotadas (base calling)?

a)

5' - TAAGCGCACTGTG - 3'

b)

3' - TAAGCGCACTGTG - 5'

c)

5' - ATTCGCGTGACAC - 3'

d)

3' - ATTCGCGTGACAC - 5'

5.

Para la siguiente secuencia resultado de secuenciación Sanger 5'- ATGCTAGCTA -3', ¿Cuál será la secuencia molde?

a)

3'- ATGCTAGCTA -5'

b)

5'- ATGCTAGCTA -3'

c)

5'- TACGATCGAT -3'

d)

3'- TACGATCGAT -5'

6.

Nombre que recibe el aparato que se emplea para visualizar las bandas de la separación por electroforesis

a)

Espectrofotómetro

b)

Transiluminador

c)

Termociclador

d)

Termomixer

7.

¿Cuántos segundos aproximadamente deberá durar la elongación o extensión de un fragmento de 795 bp?

a)

48 s

b)

90 s

c)

30 s

d)

40 s

8.

¿Cuál será la temperatura de fusión o Tm para la secuencia del siguiente oligonucleótido:

5'-AGTACGTCGATCGA-3'

a)

48ºC

b)

42ºC

c)

37ºC

d)

60ºC

9.

Componentes variables de una reacción de PCR

a)

ADN molde

b)

Primers

c)

Agua libre de nucleasas

d)

dNTPs

10.

¿Cuál es el principio fundamental detrás del método de secuenciación Sanger?

a)

Amplificación del ADN mediante PCR

b)

Utilización de ADN polimerasas termoestables

c)

   Secuenciación basada en la terminación de la cadena de ADN

d)

Fragmentación aleatoria del ADN genómico