Rekayasa seluler CHO

Transfeksi plasmid ke dalam sel CHO

Seleksi klonal dan penyaringan

Pemurnian dan pemolesan

Skalabilitas industri yang terbatas

Biaya modal yang rendah

Produksi yang sangat efisien tanpa kendala

Tidak diperlukan penelitian lebih lanjut dalam downstream processing

Karena menggunakan metode yang lebih rumit

Tidak memerlukan uji klinis yang ekstensif seperti obat asli

Diproduksi dalam jumlah yang lebih sedikit

Mengandung komponen berbeda dari obat asli

Menstimulasi produksi sel B dalam darah

Mengikat marker CD20 pada sel B dan memicu kematian sel

Meningkatkan jumlah antibodi poliklonal dalam tubuh

Menghambat produksi sel darah merah

Murine monoclonal antibodies

Chimeric monoclonal antibodies

Humanized monoclonal antibodies

Human monoclonal antibodies

Sel CHO dapat mengalami modifikasi pasca-translas

Sel CHO memiliki tingkat mutasi yang tinggi

Sel CHO tidak dapat bertahan dalam lingkungan kultur

Sel CHO hanya dapat digunakan dalam penelitian hewan

Produksi lebih cepat tanpa perlu teknik kultur sel

Memiliki spesifisitas tinggi terhadap target molekul tertentu

Tidak memerlukan teknologi rekayasa genetika

Dapat mengenali banyak antigen sekaligus

Ketidakstabilan sel hybridoma

Produksi antibodi yang terlalu tinggi

Tidak dapat digunakan untuk terapi kanker

Hanya dapat diproduksi dalam skala laboratorium

Biaya produksi yang sangat rendah

Metode yang sederhana dan tidak memerlukan optimasi

Teknologi yang andal, kuat, dan relatif matang untuk produksi biofarmasi

Tidak memerlukan pemantauan kondisi bioreaktor

Seleksi sel dengan produktivitas tinggi

Kondisi media dan bioreaktor yang sesuai

Penggunaan sensor in-line untuk kontrol proses

Semua jawaban benar

Ketersediaan bahan baku murah

Kesulitan dalam meningkatkan skala produksi

Kurangnya permintaan terhadap antibodi monoklonal

Metode kultur sel yang tidak dapat diandalkan

Memastikan ekspresi protein dengan biaya termurah

Menghasilkan antibodi dengan produktivitas tinggi dan kualitas yang dapat diterima

Mengurangi ketergantungan pada bioreaktor skala besar

Menghindari penggunaan sel mamalia dalam produksi

Sel ini tidak memerlukan kolesterol dalam media kultur

NS0 merupakan sel non-imunoglobulin yang dapat digunakan dalam berbagai terapi

Sel NS0 memiliki aktivitas glutamin sintetase (GS) endogen yang memungkinkan seleksi dengan metotreksat

Sel NS0 memiliki aktivitas DHFR yang tinggi

CHO adalah sel utama yang digunakan dalam produksi protein rekombinan

Sel CHO tidak memerlukan media kultur khusus

Sel CHO memiliki proliferasi lebih lambat dibandingkan sel lain

CHO hanya digunakan karena alasan ekonomi

Mempercepat transkripsi mRNA

Meningkatkan stabilitas mRNA yang ditranskripsi

Menghambat translasi protein untuk menghindari produksi berlebihan

Menonaktifkan ekspresi antibodi setelah produksi awal

Meningkatkan ekspresi gen target

Mengurangi kecepatan translasi protein

Menghilangkan kebutuhan akan seleksi antibiotik

Meningkatkan degradasi mRNA

Untuk memastikan hanya sel yang mengandung vektor ekspresi yang dapat tumbuh

Untuk mengurangi kebutuhan akan antibiotik dalam media kultur

Untuk menghambat pertumbuhan sel yang tidak menghasilkan protein

Untuk memastikan semua sel dalam populasi memiliki ekspresi yang sama

Sebagai antibiotik untuk mencegah kontaminasi

Sebagai agen pemicu mutasi untuk meningkatkan variasi genetik

Sebagai marker seleksi untuk menghasilkan lini sel antibodi yang stabil

Sebagai substrat enzimatik untuk meningkatkan ekspresi protein

Karena memungkinkan penggunaan dua antibiotik dalam satu media kultur

Karena memungkinkan seleksi sel dengan dua marker berbeda secara simultan

Karena meningkatkan mutasi spontan dalam produksi antibodi

Karena mempercepat degradasi mRNA dalam sel CHO

Dengan mengamati morfologi sel secara mikroskopis

Dengan menggunakan ELISA untuk mengukur titer antibodi

Dengan menghitung jumlah sel yang tumbuh dalam medium

Dengan mengukur kadar glukosa dalam medium kultur

Untuk meningkatkan pertumbuhan sel dengan menambahkan glukosa

Untuk meningkatkan kualitas dan produksi antibodi dengan memodifikasi struktur glikan

Untuk mengurangi kebutuhan oksigen dalam bioreaktor

Untuk menghindari degradasi protein dalam medium kultur

Karena struktur glikan dapat mempengaruhi aktivitas dan sifat antibodi

Karena glikosilasi meningkatkan degradasi protein dalam bioreaktor

Karena glikosilasi dapat menghambat translasi protein

Karena antibodi tidak dapat berfungsi tanpa glikosilasi

Meningkatkan aktivitas ADCC (Antibody-Dependent Cell Cytotoxicity)

Meningkatkan degradasi antibodi dalam sel

Memperlambat proses translasi mRNA

Meningkatkan biaya produksi antibodi

Untuk meningkatkan produksi antibodi dengan mencegah glikosilasi

Untuk meningkatkan fukosilasi dalam antibodi

Untuk meningkatkan efektivitas ADCC dengan meningkatkan bisecting GlcNAc residu pada antibodi

Untuk mengurangi jumlah antibodi yang diproduksi dalam bioreaktor

Untuk meningkatkan ekspresi protein dalam sel

Untuk mengkloning fragmen PCR ke dalam plasmid dengan efisien

Untuk menghambat translasi protein dalam sel HEK293

Untuk menonaktifkan gen BubR1 dan Mad2

Untuk meningkatkan ekspresi antibodi

Untuk mencegah kontaminasi bakteri atau jamur

Untuk menekan pertumbuhan sel yang tidak diinginkan

Untuk meningkatkan kecepatan pembelahan sel

Dengan presipitasi etanol

Dengan pencucian menggunakan PBS

Dengan Protein A Sepharose dan filtrasi

Dengan elektroforesis SDS-PAGE

Sebagai medium transien yang digunakan untuk meningkatkan efisiensi transfection

Sebagai agen buffering untuk mempertahankan pH medium

Sebagai inhibitor enzim protease

Sebagai pewarna fluoresen untuk menandai antibodi

Meningkatkan ekspresi BubR1

Menurunkan reaktivitas antibodi mAb-BubR1™ terhadap kinetokor

Mempercepat pembelahan sel

Menyebabkan sel apoptosis langsung

Meningkatkan penggunaan hewan dalam penelitian

Menghasilkan antibodi yang lebih murah tetapi kurang spesifik

Mengembangkan antibodi monoklonal yang lebih dapat direproduksi dan etis

Mengurangi kebutuhan akan antibodi dalam penelitian

Menggunakan teknik hibridoma pada tikus

Menggunakan rekayasa protein untuk mengubah fragmen antibodi menjadi antibodi utuh

Mengisolasi antibodi langsung dari darah manusia

Menggunakan antibodi poliklonal sebagai pengganti antibodi monoklonal

Lebih murah tetapi kurang stabil

Dapat diproduksi dalam jumlah besar dengan biaya rendah

Tidak memerlukan ekspresi protein

Menggunakan lebih banyak hewan untuk produksinya

Karena dapat mempengaruhi sifat kritis produk dan konsistensi proses

Karena dapat meningkatkan efisiensi ekspresi antibodi

Karena dapat mengurangi kebutuhan pemurnian antibodi

Karena dapat meningkatkan stabilitas buffer

Identifikasi baru dari glikosilasi Fab yang sebelumnya tidak terdeteksi

Tidak ada perbedaan dalam distribusi muatan dibandingkan metode konvensional

Peningkatan stabilitas antibodi dalam larutan

Penurunan aktivitas biologis antibodi

Inkompatibilitas buffer IEX konvensional dengan deteksi langsung MS

Kesulitan dalam ekspresi antibodi dalam sel mamalia

Rendahnya stabilitas antibodi dalam lingkungan fisiologis

Kesulitan dalam menentukan struktur primer antibodi

SCX-MS memungkinkan deteksi langsung varian muatan tanpa isolasi puncak

SCX-MS lebih murah dibandingkan IEX

SCX-MS lebih cepat dalam proses pemurnian antibodi

SCX-MS menghilangkan kebutuhan akan analisis massal glikan

IEX tidak dapat memisahkan antibodi monoklonal

Buffer IEX konvensional tidak kompatibel dengan deteksi langsung MS

IEX hanya dapat digunakan untuk molekul kecil

MS tidak dapat mendeteksi varian muatan dalam antibodi

SCX-MS lebih cepat dan tidak memerlukan sistem instrumen tambahan

SCX-MS lebih lambat tetapi memberikan resolusi lebih tinggi

SCX-MS memerlukan lebih banyak sampel untuk analisis

SCX-MS tidak dapat mendeteksi varian muatan dengan kelimpahan rendah

Memisahkan fragmen Fab dan Fc

Menghilangkan glikan dari rantai berat antibodi

Menstabilkan struktur antibodi sebelum analisis

Meningkatkan kelarutan antibodi dalam buffer