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WorksheetsRT-qPCR
Total questions: 11
Worksheet time: 6mins
¿Cúal es el orden de las etapas desde la toma de muestra hasta el resultado en un ensayo diagnóstico RT-qPCR?
Extracción de RNA → Toma de muestra → RT-qPCR → Análisis de curva
Toma de muestra → Transporte/almacenamiento → Extracción de RNA → RT-qPCR → Análisis
RT-qPCR → Extracción de RNA → Toma de muestra → Emisión de resultado
Toma de muestra → RT-qPCR → Extracción de RNA → Análisis.
¿Qué temperaturas corresponden típicamente a los pasos de un ciclo de RT-qPCR?
Desnaturalización 72 °C - Alineamiento 95 °C - Extensión 60 °C
Desnaturalización 95 °C - Alineamiento 60 °C - Extensión 72 °C
Desnaturalización 60 °C - Alineamiento 72 °C - Extensión 95 °C
Desnaturalización 50 °C - Alineamiento 72 °C- Extensión 95 °C
¿Qué significa un Ct bajo frente a un Ct alto?
Ct bajo = baja cantidad inicial de RNA diana
Ct bajo = ausencia de RNA diana
Ct bajo = alta cantidad inicial de RNA diana
Ct alto = alta cantidad inicial de RNA diana
¿Qué es Ct?
ciclo en que la muestra se congela
concentración de reactivos
ciclo en el que la fluorescencia cruza el umbral
cantidad de contaminantes
¿Cuál de los siguientes conjuntos contiene tres controles esenciales en una corrida diagnóstica de RT-qPCR?
Control positivo, control de extracción, control negativo
Control positivo, prueba rápida de anticuerpos, control de integridad proteica
Control de colorante, control de pH, control de voltaje eléctrico
Control de temperatura, control de iluminación del laboratorio, control de puerta
¿Cuáles de las siguientes opciones es causal de un resultado falso negativo en RT-qPCR?
Usar un kit nuevo
Almacenamiento inadecuado
Alta carga viral
Varios genes diana
¿Por qué la fase exponencial de la curva de amplificación es la más adecuada para cuantificar?
Porque la reacción está saturada y la señal se estabiliza.
Porque en esta fase el producto crece exponencialmente y es proporcional.
Porque hay poca señal y se reduce el ruido de lectura.
Porque sólo en la meseta se puede medir la velocidad enzimática.
Si el control negativo muestra amplificación por debajo del Ct de corte, ¿qué implica y qué se debe hacer inmediatamente?
Continuar e informar resultados.
Existe contaminación: detener, investigar y repetir.
Muestra positiva: reportar como positiva.
Falla térmica: reiniciar equipo y repetir.
¿Cuál es una medida eficaz para prevenir la degradación del ARN en muestras destinadas a PCR?
Almacenar las muestras a temperatura ambiente.
Evitar ciclos de congelación/descongelación
Reutilizar puntas y tubos entre muestras.
Añadir fenol al medio de transporte.
¿Cuál de las siguientes situaciones favorece la degradación del ARN en la muestra?
Uso de consumibles libres de nucleasas
Ciclos repetidos de congelación y descongelación
Almacenamiento constante a -80 °C
pH neutro y controlado
¿Cuál es una estrategia adecuada para prevenir inhibición y degradación en PCR?
Seleccionar protocolos de extracción validados e incluir controles de inhibición.
Reutilizar puntas y tubos para ahorrar consumibles.
Mantener todas las muestras a temperatura ambiente indefinidamente.
Omitir controles internos si el control positivo amplifica.
