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Solo una de las siguientes afirmaciones sobre la PCR es incorrecta.
En cada uno de sus ciclos se produce la desnaturalización del molde, su hibridación con los cebadores y la
síntesis de ADN.
Es una técnica que ha revolucionado la Biología y permite la amplificación de ADN sin requerir células
hospedadoras.
Es un método muy versátil ya que todas las polimerasas termoestables pueden utilizar ADN o ARN como
molde.
Sus productos de reacción mayoritarios son moléculas de ADN lineales y bicatenarias.
Se desea clonar el ADNc del gen de la insulina de ratón, que se expresa específicamente en células del
páncreas, en un vector plasmídico de Escherichia coli. Solo una de las siguientes estrategias conducirá a la
obtención del inserto correcto: el aislamiento de:
ARN de páncreas de ratón para su retrotranscripción y amplificación específica mediante PCR.
ADN genómico de páncreas de ratón para su amplificación específica mediante PCR
ADN genómico de cualquier tejido del ratón para su retrotranscripción y amplificación específica mediante
PCR.
ARN de páncreas de ratón para su amplificación específica mediante PCR
Solo una de las siguientes afirmaciones es falsa. Para producir proteínas eucarióticas en Escherichia coli se
debe utilizar
ADNc en lugar de ADN genómico si el gen eucariótico posee intrones
un promotor de Escherichia coli.
secuencias terminadoras de la transcripción de Escherichia coli
una señal de poliadenilación.
La figura representa el perfil de un ciclo de amplificación mediante PCR. Solo una de las siguientes
afirmaciones es falsa
En la etapa 1 se produce la desnaturalización del molde.
En la etapa 2 se produce la hibridación entre los cebadores y el molde
Habitualmente, en un experimento de PCR se repite cada ciclo 30-40 veces.
La duración de la etapa 3 depende de la temperatura de fusión de los cebadores
Solo una de las siguientes afirmaciones relacionadas con la clonación molecular no es cierta.
Requiere: (1) la unión covalente, in vitro, del inserto a un vector, (2) la incorporación de la construcción
resultante a un hospedador adecuado y (3) la selección posterior de los transformantes o las células infectadas
de interés.
La autoligación del vector resta eficacia al proceso; para evitarla, tras la digestión del vector se pueden
desfosforilar sus extremos 5′.
Su objetivo principal es que el ADN exógeno se mantenga estable en el organismo hospedador, es decir que
no se degrade, que se replique y que se transmita a las células hijas.
La utilización de una única endonucleasa de restricción conduce a la obtención de un único tipo de
construcción, ya que el inserto se une siempre al vector con la misma orientación.
Solo una de las siguientes afirmaciones es falsa
El genoma de un organismo es el mismo en casi todas sus células somáticas pero el transcriptoma y el
proteoma difieren en distintos tejidos y órganos.
Los cebadores para RT-PCR cuantitativa deben ser degenerados
Los insertos de una genoteca de ADNc no contienen intrones
Los productos de amplificación mediante PCR obtenidos con la polimerasa Taq presentan una A sobresaliente
en 3′.
Solo una de las respues siguientes es correcta. El vector más adecuado para la clonación de un inserto de 3
kb es un
plásmido
Cósmido
YAC
BAC
Solo una de las siguientes afirmaciones en relación con la selección de colonias azules/blancas es cierta
Se le denomina también selección cromogénica de clones recombinantes
En este tipo de experimentos, las bacterias hospedadoras suelen contener el alelo lacZ′ del gen lacZ
En este tipo de experimentos, los vectores suelen contener en su sitio de clonación múltiple el alelo lacZ
M15
del gen lacZ
Las colonias blancas son las que contienen un vector sin inserto.
Solo una de las siguientes respuestas es falsa. En relación con las polimerasas de ADN dependientes de ADN,
puede decirse que
ninguna presenta actividad polimerasa 5′3′.
algunas presentan actividad exonucleasa 3′5′.
algunas presentan actividad exonucleasa 5′3′.
algunas presentan actividad transferasa terminal.
Solo una de las siguientes afirmaciones sobre los vectores plasmídicos contemporáneos es correcta.
Los de expresión se utilizan para mantener establemente un inserto en las células hospedadoras.
Su sitio de clonación múltiple contiene ADN originalmente presente en el genoma de una medusa.
Casi todos incluyen dos marcadores seleccionables y al menos un origen de replicación.
Casi todos son de replicación restringida.
Solo una de las siguientes respuestas es correcta. El gen Amp R codifica
la ampicilina.
una enzima que degrada la ampicilina
un antibiótico que inhibe a la ampicilina
una enzima que participa en la síntesis de ampicilina
Solo una de las siguientes actividades enzimáticas puede catalizar la primera etapa de una qRT-PCR:
una retrotranscriptasa.
una DNasa.
) una nucleotidil transferasa terminal.
una RNasa H
El vector más adecuado para la clonación de un inserto de 3 kb es un
Plásmido
YAC
PAC
Cósmido
Solo una de las respuestas siguientes es falsa. Es conveniente que los cebadores de una PCR
no generen autodímeros por apareamiento intercatenario.
no generen dímeros por apareamiento intercatenario.
no generen horquillas por apareamiento intracatenario.
tengan temperaturas de fusión que no difieran en más de 10°C
Solo uno de los siguientes métodos permite convertir en cohesivos los extremos romos de una molécula
bicatenaria de ADN.
Adición de colas homopoliméricas
Desplazamiento de mella
Ligación de adaptadores.
Desfosforilación de extremos 5′.
Solo una de las afirmaciones siguientes sobre la solubilidad del ADN en agua es falsa
Se debe a la polaridad de sus grupos fosfato.
Las sales de Na + la reducen.
Las sales de NH 4+ la reducen
Los alcoholes la incrementan.
Como se usa el Cloranfenicol en la amplificación de plásmidos
Aumentar la velocidad de replicación del plásmido en todas las bacterias.
Seleccionar las bacterias que contienen el plásmido, eliminando las que no lo tienen.
Activar el promotor del gen clonado dentro del plásmido.
Inducir la síntesis de proteínas bacterianas para mejorar la multiplicación celular.
Que función tiene el CTAB, en la extración de ADN
Formar complejos con el ADN para precipitarlo
Romper la membrana nuclear para liberar el ADN
Actuar como un agente antioxidante para proteger el ADN de la degradación
Cortar selectivamente el ADN genómico en fragmentos pequeños
Que resistencias tiene el plásmido pbr322
Cloranfenicol y Ampicilina
Ampicilina y Amoxicilina
Tetraciclina y Amoxicilina
Ampicilina y Tetraciclina
Que necesita la ligasa T4, para funcionar
Extremos 3'OH libres y extremo 5'P
Extremos 3'P libres y extremos 5'P
Extremos 3'OH libres y ATP
Extremos 3'OH y un café
Cuales son las fases de purificación de ADN
Lisis, Eliminación de contaminnates, Lavado del pellet, Precipitación
Eliminación de contaminantes, Lisis Lavado del pellet, Precipitación
Lisis, Eliminación de contaminnates, Precipitación, Lavado del pellet
Lisis, Eliminación de contaminnates, Precipitación, Beberse el contenido del matraz
Como se protejen las bacterias de las enzimas de restricción
Enzimas inactivadoras
Metilando su ADN
Colas PoliAdenina
Histonas
En que fase de la PCR se unen los cebadores al molde
Fase de Extensión
Fase de alineamiento
Desnaturalización inicial
Fase de polimerización
