TUTORIAL IMUNOHISTOKIMIA

Immunohistokima merupakan teknik untuk mengesan

• Sel.

• DNA.

• mRNA.

• Protein.

Enzim reporter yang biasa digunakan pada secondary antibodies adalah

• phospholipase

• alkaline phosphatase

• aspartate transaminase

• horseradish

  peroxidase

Langkah antigen retrieval dilakukan untuk

• Hidrasi tisu

• Mengelakkan unspesific binding

• Menghilangkan cross-linked proteins

• Menghilangkan background staining

Label yang digunakan dalam direct method immunohistokimia melibatkan

• antigen dan reporter

• antibodi dan reporter

• biotin dan peroxidase

• avidin & biotin complex

Background staining dalam immunohistokimia disebabkan oleh

• antibodi tidak spesifik

• kehadiran enzim exogeneous

• pencairan antibodi terlalu tinggi

• proses antigen retrieval tidak sempurna

Tisu negative control dalam teknik immunohistokima digunakan untuk

• pengesahan spesifisiti antibodi

• menguji kehadiran enzim endogeneous

• mengelakkan berlakunya keputusan false negative

• pengesahan pencairan yang digunakan adalah betul

Parameter untuk menentukan pengesahan dalam mengawal kualiti IHCimunohistokimia adalah seperti berikut KECUALI

• Spesifisiti

• Sensitiviti

• Ketepatan (accuracy)

• Non-reproducibility (variasi antara batch)

Kaedah yang digunakan untuk menyingkirkan enzim endogenous dalam pencelupan imunohistokimia ialah menggunakan

• Proteinase K.

• Hydrogen peroxide.

• Phosphate buffer saline.

• Antigen retrieval solution.

Jenis kromogen yang sering digunakan di makmal perubatan masa kini ialah

• 4-chloro-1-napthol.

• Hanker-Yates reagent.

• 3-amino-9-ethylcarbazole.

• 3,3-diaminobenzidinetetrahydrochloride.

Prinsip pencelupan imunohistokimia jenis indirect ialah enzim pada antibodi sekunder bertindak balas dengan substrat-kromogen 4-chloro-1-napthol menghasilkan warna

• biru.

• perang.

• biru gelap.

• merah ungu.