เคมีของสีย้อมและการย้อมสี

Auxochrome

Chromogen

Chromophore

Substrate

เป็นส่วนของสารประกอบอนินทรีย์

โดยทั่วไปไม่มีสี

ต้องเชื่อมจับกับ Chromophore

เป็นส่วนแสดงสี

ไม่แตกตัวเป็นไอออน

สร้าง ionic bond กับองค์ประกอบของเซลล์

เพิ่ม free electron ให้ chromophore

อาจมีได้มากกว่าหนึ่งโมเลกุล

การเกิดสีเป็นผลเนื่องจาก auxochrome

การติดสีขึ้นอยู่กับ electric charge ของ auxochrome

การติดสีเกิดจากการแตกตัวของ chromophore

ถูกทุกข้อ

สีประจุลบ เรียกอีกชื่อว่า acid dye ย้อมติดไซโทพลาซึม

สีประจุบวก เรียกอีกชื่อว่า basic dye ย้อมติดนิวเคลียส

การติด natural dye เกิดจากการตกตะกอนของสี

สีลิแกนต์ มีสภาพเป็นเบสอ่อน ละลายในน้ำได้ดี

การย้อมสีประกอบด้วยกระบวนการเชิงกายภาพ

และกระบวนการเชิงเคมี

กระบวนการเชิงกายภาพของการย้อมสี

คือ การละลายของสี และ การดูดซึมสี

กระบวนการเขิงเคมี คือ ปฏิกิริยาระหว่างสีย้อม

และองค์ประกอบของคัวอย่าง

สีกรดและสีเบสจะสร้างพันธะโคเวเลนต์

กับโครงสร้างของเซลล์

Mordant คือ สารที่ช่วยให้ติดสีเข้มขึ้นกว่าเดิม

Accentuator คือ สารที่ช่วยให้โมเลกุลสีจับกับ

องค์ประกอบของเนื้อเยื่อได้

สารช่วยติดสีมีอยู่กลุ่มเดียว คือ metal salt

สารเน้นสีมี 3 กลุ่ม คือ pH control, salt และ benzene

เป็นการย้อมให้ติดสีทีละน้อย

ใช้กับสีที่ติดแล้วล้างออกง่าย

ต้องควบคุมเวลาย้อมให้ดี

ตัวอย่างเช่น การย้อมสี eosin

เป็นการย้อมให้ติดสีเกินพอดี

เมื่อย้อมเสร็จแล้วต้อง destain สีย้อม

ไม่จำเป็นต้องควบคุมเวลาอย่างรัดกุม

ตัวอย่างเช่น การย้อมสี hematoxylin

Rehydration

Dehydration

Differentiation

Desataining