Protéines hétérologues : Bilan / Révisions

Un vecteur d'expression se distingue d'un vecteur de clonage par.....

• La présence de deux origines de réplication (procaryote et eucaryote)

• La présence d'un gène de résistance à un antibiotique

• La présence d'un promoteur constitutionnel

• La présence d'un promoteur inductible

L'expression d'une protéine hétérologue doit se faire....

• Lors de la phase de plateau, après la phase exponentielle

• Au début de la culture pour permettre un maximum de production

• Dans la seconde partie de la phase exponentielle

• A 30°C

• De façon contrôlée grâce à l'ajout d'un inducteur dans le milieu de culture.

Un vecteur d’expression comprend systématiquement les éléments suivants (dans l’ordre) :

- Un promoteur (a)   , le plus souvent inductible, en amont de la séquence clonée. Ce promoteur permet l’expression très importante du gène, après induction.

Un vecteur d’expression comprend systématiquement les éléments suivants (dans l’ordre) :

- Un (a)   qui permettra la traduction de la protéine.

Un vecteur d’expression comprend systématiquement les éléments suivants (dans l’ordre) :

- Un (a)   permettant le sous-clonage aisé du gène.

Un vecteur d’expression comprend systématiquement les éléments suivants (dans l’ordre) :

- Une (a)   , insérée dans le polylinker, qui permettra de créer une protéine de fusion, facilement détectable et purifiable,.

Sur ce plasmide, quel est l'élément qui permet de contrôler l'expression de la protéine hétérologue qui sera exprimée?

(a)  

Sur ce plasmide, quel est l'élément qui permet de contrôler l'expression de la protéine hétérologue qui sera exprimée?

(a)  

On souhaite cloner la séquence écrite en haut de la figure grâce aux enzymes EcoRI et NotI. Quel vecteur devra-t-on choisir?

• pGEX-6P-1

• pGEX-6P-2

• pGEX-6P-3

Ce système E. coli BL21 / pET

• Est contrôlé grâce à l'induction de l'IPTG

• Est contrôlé par la présence du lysozyme

• Permet un double contrôle

• Permet un contrôle optimal des fuites du promoteur