HT Lez 3

Nel saggio EMSA:

 

• Il DNA viene marcato con un isotopo radioattivo o una sonda fluorescente

• Il DNA marcato viene messo a contatto con un estratto proteico

•   il complesso proteina-acido nucleico migra più lentamente nel gel

• se si lega un anticorpo al complesso DNA-proteina si ha un super-shift

• tutte le altre risposte sono corrette

Qual è la funzione dei primer oligonucleotidici nella PCR?

• Permettono di copiare il DNA

• Forniscono i nucleotidi per la DNA polimerasi

• Identificano la particolare regione di DNA che deve essere amplificata

• costituiscono i marcatori di peso molecolare usati come riferimento nell' elettroforesi

•   forniscono l’innesco per la primasi

   In cosa differiscono la PCR e la PCR quantitativa o Real-time PCR?

• Nella PCR quantitativa i risultati di amplificazione genica si possono seguire ad ogni ciclo

• La PCR è un processo isotermico

• i primer oligonucleotidici vengono usati solo nella PCR quantitativa

• Il numero di cicli è diverso

• La Taq polimerasi si usa solo nella PCR

Perché i frammenti di DNA riescono a migrare nel gel di elettroforesi?

•   Il DNA è carico negativamente quindi migra verso il polo positivo

•   Il DNA si muove finchè non raggiunge il punto isoelettrico

• il DNA si muove per diffusione

  D)  

• Il DNA si muove verso il polo positivo o negativo a seconda del pH della soluzione

• Il DNA si muove per sedimentazione

   Quale tra i seguenti fattori influenza negativamente la sedimentazione di una particella sottoposta a centrifugazione?

 

• Il peso della particella

• La viscosità della soluzione

• Il campo centrifugo

• La distanza dall’asse di rotazione

• Nessuna delle risposte è corretta

    Come possiamo separare l’mRNA messaggero da una miscela di RNA?

• Mediante cromatografia di affinità immobilizzando code di PoliA sulla fase stazionaria

• Mediante cromatografia di affinità immobilizzando code di Poli(T) sulla fase stazionaria

• Mediante cromatografia di immunoaffinità con il suo anticorpo complementare

• Mediante elettroforesi

• Mediante cromatografia a esclusione molecolare

Qual è la corretta flow chart per l’isolamento di biomolecole da cellule o tessuti?

• Caratterizzazione qualitativa e quantitativa-omogenizzazione-centrifugazione-concentrazione

• Degradazione contaminanti- omogenizzazione- centrifugazione

• Omogenizzazione-centrifugazione- degradazione contaminanti- concentrazione- caratterizzazione qualitativa e quantitativa

• Centrifugazione-concentrazione-caratterizzazione qualitativa e quantitativa

• Concentrazione-centrifugazione-omogenizzazione-degradazione

    Come avviene la visualizzazione del DNA separato mediante gel elettroforesi?

• Mediante una sonda marcata radioattivamente

• Mediante colorazione con bromuro di etidio o con un altro colorante specifico del DNA

• Mediante colorazione con ematossilina-eosina

• Mediante anticorpi fluorescenti

•    Il DNA è direttamente visibile agli UV

  Nella fase di annealing della PCR:

•    La temperatura è alta per permettere la separazione dei filamenti

• I primer sintetici legano le sequenze target sul DNA da amplificare

• La bassa temperatura impedisce la denaturazione della polimerasi

• La primasi inizia a sintetizzare il primer complementare

• I filamenti di DNA si riappaiano

   Quale di queste tecniche permette di seguire l’espressione di migliaia di geni di interesse?

• Il southern blotting

• La PCR

• L’EMSA

• Il DNA microarray

• La genomica