MODUL 6 KONSTRUKSI PLASMID (TRANSFORMASI)

Mana dari pilihan ini yang paling tepat mengenai pengertian transformasi dalam konstruksi plasmid?

• Transformasi merupakan tahapan memindahkan Sel E.coli/yeast kedalam plasmid DNA yang telah diisolasi

• Transformasi merupakan tahap membersihkan plasmid DNA yang ada pada sel E.coli/yeast

• Transformasi merupakan tahap pengenalan/pemasukan plasmid DNA ke dalam sel E.coli atau yeast

• Transformasi merupakan tahapan pemindahan plasmid dna yang ada pada sel E.coli menuju sel bakteri lainnya

• Transformasi merupakan tahapan penguraian plasmid DNA dan dalam pemindahan menuju sel E.coli/yeast

Transformasi dapat dilakukan ketika plasmid DNA telah ……. dan siap untuk masuk ke dalam sel inang

• Direkonstruksi

• Dieliminasi

• Dibersihkan

• Dielusi

• Diuraikan

Sel inang yang akan diintroduksikan plasmid DNA harus dibuat kompeten agar?

• Siap untuk uraikan dari luar sel inang

• Siap menerima bahan asing dari luar sel inang

• Siap memperbanyak diri sendiri

• Siap memperbaiki kerusakan yang terdapat pada sel inang

• Siap memperbanyak diri sendiri

Beberapa metode untuk menyiapkan sel inang kompten dan proses transformasi diantaranya adalah

• Metode Hanahan, metode Inoue, menggunakan Natrium klorida

• Metode Hanahan, metode Naranjo, menggunakan Natrium klorida

• Elektroporasi, Metode Inoue, dan menggunakan kalsium klorida

• Metode Hanahan, Metode Naranjo, elektoporasi

• Metode Naranjo, Elektroporasi, menggunakan kalsium klorida

Metode yang akan digunakan pada percobaan di modul ini yaitu

• Metode Naranjo

• Menggunakan kalsium klorida

• Menggunakan Natrium klorida

• Metode Hanahan

• Metode Vector Section

Sebelum dilakukan proses transformasi dan penyiapan sel kompeten pastikan kultur sel yang dimiliki berada di fase?

• Fase log

• Fase eksponensial

• Fase stationer

• Fase kematian

• Fase ordinary

Pada penyiapan sel kompeten saat Inokulasikan 4 mL kultur ke dalam 400 mL media LB steril dalam 2 Liter flask. Tumbuhkan pada suhu 37oC, shaking pada kecepatan …..rpm hingga mencapai OD590 bernilai ….

• 350;0,267

• 250;0,375

• 250;0,275

• 350;0,275

• 250;0,275

Sentrifugasi sel selama 5 menit pada ……., suhu suhu 4 oC. Buang supernatant dan resuspensi setiap pellet dengan 2 mL larutan CaCl2 dingin

• 1500 x g (2500 rpm)

• 1500 x g (2700 rpm)

• 1100 x g (2700 rpm)

• 1100 x g ( 2500 rpm)

• 1300 x g (2500 rpm)

Pada metode transformasi dengan chemical transformation ditambahkan ….. shock dalam prosesnya

• Light

• Electric

• Freeze

• Sonic

• Heat

Aliquot 10 ng DNA (volume 10-25 µL) ke dalam tube steril 15 mL round-bottom dan tempatkan di

• Penghangat

• Inkubator

• Es

• Air hangat

• Heating Mantle