genética prática

Indique os tipos de métodos pelos quais o DNA genômico pode ser isolado de outros compostos celulares.

Answer explanation

Salting out

Lisados brutos

Métodos de extração orgânica

Métodos de troca aniónica

Método baseado em sílica-gel.

Que tipo de método foi usado nas aulas práticas para isolar DNA genómico?

• Salting-out

• Lisados Brutos

• Método de extração orgânica

• Método de troca aniónica

• Método baseado em sílica-gel

Qual a função da proteína K?

• lise celular

• remover proteínas e contaminantes

• digestão por incubação

• Ou seja, desnatura proteínas e emulsiona membranas

• Ou seja, faz digestão enzimática

Qual a função da SDS?

• lise celular

• remover proteínas e contaminantes

• digestão por incubação

• Ou seja, desnatura proteínas e emulsiona membranas

• Ou seja, faz digestão enzimática

Qual a função do NaCl durante a precipitação do DNA? Qual o modo de ação do EtOH durante a precipitação do DNA?

• NaCl - limpa parcialmente lisado bruto

  Etanol - estimula precipitação de DNA por competição, como o NaCl

• NaCl - estimula precipitação de DNA por competição, como o Etanol

  Etanol - limpa parcialmente lisado bruto

• Ambos limpam parcialmente o lisado bruto

• Ambos estimulam precipitação de DNA por competição

Os métodos de espectrofotometria e electroforense em gel de agarose podem ser usado para avaliar a qualidade do DNA extraído

• Verdadeiro

• Falso

O índice A260/A280 indica _1_ . O valor esperado para uma amostra pura é _2_ .

Answer explanation

O índice A260/A280 indica a qualidade do DNA e o valor esperado para uma amostra pura de DNA é maior ou igual a 1,8. Se for 1,4 está contaminado com proteínas e se for 1,9 está contaminado com RNA.

A que concentração está uma amostra pura de DNA com um valor de A260 de 1?

• 69μg/ml (nice)

• 75 μg/ml

• 50 μg/ml

• 25 μg/ml

• 53 μg/ml

Answer explanation

50μg/ml. Se o valor de A260 fosse 2, a concentração seria de 100μg/m

Que indicação dá sobre a qualidade do DNA extraído da sua visualização após eletroforese em gel de agarose?

Answer explanation

Banda espessa + muita quantidade de DNA + boa qualidade = Banda bem focada no local esperado sem arrastamento para baixo nem para cima.

Banda com fragmentos menores = DNA baixa qualidade ou degradado.

Também tem baixa qualidade se tiver arrastamento em direção ao poço ou para baixo

Quanto menor for o tamanho da molécula mais ela corre na agarose, mas quanto menor for a porcentagem de agarose, mais migram as moléculas maiores apesar de migrarem mais lentamente e as moléculas mais pequenas ficam desfocadas.

• Verdadeiro

• Falso