Cuestionario sobre PCR

¿Cuáles son los tres pasos del ciclo de la PCR?

• Alineación, extensión y separación.
• Alineación, replicación y separación.
• Desnaturalización, alineación y extensión.
• Desnaturalización, replicación y purificación.

¿Qué hace el termociclador en la PCR?

• El termociclador mezcla los reactivos de la PCR.
• El termociclador realiza la secuenciación del ADN.
• El termociclador aumenta la cantidad de ADN en la muestra.
• El termociclador controla las temperaturas necesarias para la PCR.

¿Cuáles son los componentes esenciales de la PCR?

• Molde de ADN, cebadores, aminoácidos y polimerasa de ADN.
• Molde de ARN, cebadores, nucleótidos y polimerasa de ARN.
• Molde de ADN, cebadores, nucleótidos y enzimas de restricción.
• Molde de ADN, cebadores, nucleótidos y polimerasa de ADN.

¿Qué características tiene la Taq polimerasa?

• Es una enzima que se descompone a altas temperaturas.
• Es una proteína que solo se activa a temperaturas bajas.
• Es una enzima que sintetiza ARN en lugar de ADN.
• Es una enzima termoestable que sintetiza ADN a altas temperaturas.

¿Qué ocurre si se utilizan cantidades muy altas de ADN molde?

• No hay ningún efecto en la reacción.
• Se obtienen productos más específicos y aumenta la eficiencia.
• Se produce una mayor cantidad de ADN molde.
• Se pueden obtener productos no específicos y disminuir la eficiencia de la reacción.

¿Cuáles son las recomendaciones generales sobre el diseño de primers de PCR?

• 15–30 nt de largo

• Un C o G en 3′ final

• Estructura secundaria (complementariedades)

• Tm 55–70°C (dentro de 5°C, para dos imprimaciones)

• 40-60% de GC (con distribución uniforme)

¿Cuál es la concentración final recomendada de cada dNTP en aplicaciones comunes de PCR?

• 0.1 mM

• 0.2 mM

• 0.3 mM

• 0.4 mM

¿Qué componentes suelen incluir los buffers optimizados para la actividad de la ADN polimerasa?

• Sales como cloruro de magnesio

• Cloruro de potasio

• Tris

• Estabilizadores como albúmina de suero bovino (BSA) o gelatina

¿Cuáles son algunas variantes de la PCR?

• PCR en tiempo real (qPCR)

• PCR anidada

• RT-PCR (Reverse Transcription PCR)

• PCR múltiple

¿Cuáles son algunas aplicaciones de la PCR?

• Clonación de ADN

• Diagnóstico médico

• Análisis forense

• Secuenciación de genes

• Estudios filogenéticos