PreTest Teknologi CRISPR/Cas9

Mengapa teknologi CRISPR/Cas9 efektif digunakan sebagai metode pengeditan gen?

• Karena CRISPR/Cas9 mampu mengenali urutan DNA secara acak

• Karena CRISPR/Cas9 dapat mendeteksi dan memotong DNA asing dengan ketepatan tinggi

• Karena CRISPR/Cas9 hanya berfungsi pada virus tertentu

• Karena CRISPR/Cas9 menghasilkan mutasi secara acak pada semua gen

Bagaimana CRISPR/Cas9 dapat membantu bakteri dalam mempertahankan diri terhadap serangan virus yang sama di kemudian hari?

• Dengan menonaktifkan enzim Cas9 untuk mencegah infeksi

• Dengan menyimpan urutan DNA dari virus yang pernah menyerang untuk mengenali serangan ulang

• Dengan mereplikasi virus dalam jumlah banyak untuk menghentikan infeksi

• Dengan membentuk protein baru yang dapat menghancurkan virus

Mengapa enzim Cas9 diperlukan dalam mekanisme pertahanan CRISPR pada bakteri?

• Karena Cas9 dapat memodifikasi urutan genetik virus

• Karena Cas9 mengikat DNA bakteri untuk meningkatkan daya tahan

• Karena Cas9 memotong DNA virus, mencegah replikasi virus dalam sel bakteri

• Karena Cas9 berperan dalam mempercepat proses transkripsi RNA

Bagaimana perkembangan penelitian CRISPR pada tahun 2012 oleh Emmanuelle Charpentier dan Jennifer Doudna mengubah pemahaman tentang aplikasinya di luar bakteri?

• Mereka menunjukkan bahwa CRISPR/Cas9 dapat mengedit gen pada organisme hidup selain bakteri

• Mereka menemukan bahwa CRISPR/Cas9 hanya efektif pada sel bakteri

• Mereka menemukan bahwa CRISPR/Cas9 dapat memotong DNA secara acak

• Mereka menemukan bahwa CRISPR hanya berfungsi sebagai sistem kekebalan di bakteri

Mengapa CRISPR/Cas9 dianggap sebagai metode yang lebih baik dibandingkan TALEN dan ZFN dalam pengeditan genetik?

• Karena CRISPR/Cas9 hanya memerlukan satu jenis protein

• Karena CRISPR/Cas9 menggunakan RNA pemandu sederhana yang lebih efisien dan cepat

• Karena CRISPR/Cas9 dapat bekerja tanpa RNA

• Karena CRISPR/Cas9 lebih mudah mengedit protein daripada DNA

Bagaimana sgRNA memastikan bahwa pemotongan oleh Cas9 terjadi pada urutan DNA target yang tepat dalam sistem CRISPR/Cas9?

• Dengan memotong DNA sendiri yang terhubung dengan PAM

• Dengan menghambat aktivitas Cas9 pada DNA yang tidak terkait

• Dengan menambahkan spacer baru ke DNA bakteri

• Dengan mengenali dan mengikat urutan DNA target melalui interaksi spesifik antara crRNA dan tracrRNA

Bagaimana mekanisme pemotongan DNA oleh Cas9 terjadi setelah kompleks crRNA-Cas terbentuk?

• Cas9 memotong DNA tanpa mengenali sekuens PAM.

• Cas9 hanya memotong DNA ketika terdapat protein lain yang terlibat.

• Cas9 mengidentifikasi sekuens PAM dan melakukan pemotongan pada lokasi yang berdekatan, memicu kerusakan Double-Strand Break.

• Cas9 melakukan pemotongan di bagian yang tidak relevan dengan DNA patogen.

Mengapa enzim Cas9 memerlukan sekuens PAM (Protospacer Adjacent Motif) dalam proses pengeditan DNA?

• Agar dapat mengenali dan membedakan DNA target dari DNA milik sendiri

• Untuk meningkatkan efisiensi pengeditan DNA.

• Sebagai pengganti RNA pemandu dalam proses pengeditan.

• Untuk mempercepat proses transkripsi DNA.

Bagaimana modifikasi sgRNA dapat mengurangi risiko mutasi off-target dalam perbaikan DNA?

• Dengan meningkatkan efisiensi pemotongan DNA di lokasi target

• Dengan merancang sgRNA agar lebih spesifik mengenali sekuens target

• Dengan mengubah struktur enzim Cas9

• Dengan menonaktifkan mekanisme HDR

Mengapa penting untuk menggunakan varian Cas9 khusus dalam mekanisme HDR (Homology-Directed Repair)?

• Agar dapat mempercepat proses perbaikan DNA

• Untuk memastikan pemotongan hanya terjadi di lokasi target

• Agar dapat menghasilkan mutasi yang lebih beragam

• Untuk menghilangkan kebutuhan akan cetakan DNA