RFLP e RADP

Durante a análise de RFLP, um pesquisador percebeu que um dos fragmentos esperados após digestão com uma enzima de restrição estava ausente. O que isso pode indicar?

• A falha na transcrição do gene.

• A ocorrência de uma mutação que criou um novo códon de parada.

• A presença de um polimorfismo que eliminou o sítio de reconhecimento da enzima

• A degradação do RNA durante a extração.

Um laboratório está utilizando a técnica de RFLP associada ao Southern blot para investigar uma mutação pontual em um gene. Qual das alternativas justifica a escolha dessa abordagem?

• A mutação altera a estrutura do RNA mensageiro, facilitando sua detecção.

• A mutação cria ou remove um sítio de restrição, modificando o padrão dos fragmentos de DNA.

• A mutação aumenta a taxa de replicação do DNA, permitindo sua visualização direta no gel

• A mutação interfere na transcrição gênica, sendo melhor detectada por sondas de RNA.

O que caracteriza a técnica RAPD?

• Utilização de enzimas de restrição específicas para gerar fragmentos de DNA

• Amplificação aleatória de regiões do genoma com primers curtos e inespecíficos

• Detecção de RNA mensageiro por sondas específicas.

• Sequenciamento de regiões hipervariáveis do DNA mitocondrial.

Na técnica RAPD, por que os primers utilizados são geralmente curtos (cerca de 10 nucleotídeos)?

• Para garantir a ligação específica a sequências conhecidas.

• Para permitir a hibridização em muitos locais do genoma.

• Porque são mais baratos que primers longos

• Para amplificar apenas regiões codificadoras do DNA.

Uma vantagem da técnica RAPD em relação a outras técnicas de marcadores moleculares é:

• Sua alta reprodutibilidade entre diferentes laboratórios.

• A necessidade de sondas específicas para hibridização.

• A possibilidade de análise sem conhecimento prévio da sequência do DNA.

• O uso exclusivo de enzimas de restrição