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WorksheetsPCR
Total questions: 10
Worksheet time: 5mins
¿Por qué es importante el Mg en la premezcla de PCR?
Actúa como cofactor de la polimerasa
Permite a correcta unión de los primers al templete de DNA
No es importante
Favorece la desnaturalización del DNA
La temperatura de anillamiento tiene como objetivo:
Promover la desnaturalización del DNA
Generar las condiciones optimas para la polimerización de la hebra naciente
Favorecer la unión de los primers al DNA
Ninguna de las anteriores
En una electroforesis en gel de agarosa el DNA migra hacia el polo negativo
Verdadero
Falso
El SYBR Green se une a la hendidura menor del DNA y emite florescencia para la cuantificación durante una qPCR
Verdadero
Falso
En una PCR anidada:
Se utilizan más de un par de primers en simutáneo
Primero se amplifica un fragmento de DNA y luego otro fragmento al interior del primero
Se hacen variaciones en la temperatura de anillamiento durante el protocolo
Se puede cuantificar el DNA a medida que se amplifica
Cual de los siguientes reactivos se añaden a una premezcla de PCR
Taq Polimrasa
Buffer TAE x1
Bufer KCl
dNTPs
Sybr safe
A la hora de diseñar unos primers, se debe evitar:
Que su contenido GC sean entre el 40% y el 60%
Que su longitud sea entre 18 y 30 nucleótidos
Que formen estructuras secundarias
Que sus Tm sean similares
Una Hot-Start polimerasa:
Es una polimerasa de alta fidelidad
Es una polimerasa de E. coli y no de T. aquaticus
Es una retrotranscriptasa
Es una polimerasa bloqueada que se activa con calor
Las sondas TaqMan tinen acoplada una molécula Q que promueve la fluorescencia de una fluoróforo cuando están cerca
Verdadero
Falso
Una muliplex PCR permite amplificar más de un marcador en una sola reacción
Verdadero
Falso
