WorksheetsExamen de rezagados
Total questions: 10
Worksheet time: 10mins
Frente a la infección por Listeria monocitogenes un paciente recibió tratamiento del día 1 al 3. Para controlar la efectividad del antibiótico ¿Cuál sería la estrategia molecular a emplear?
PCR para detectar el gen InlA
RFLP para detectar el polimorfismo del gen InlA
Secuenciamiento para analizar mutaciones de resistencia
Cultivo bacteriano, para evaluar resistencia
En la figura se observa la detección mínima de ADN por PCR para los genes iap (Listeria monocytogenes, 453pb) y prs (Listeria spp, 370 pb) mediante electroforesis en gel de agarosa al 2%. Carril: 1) marcador ladder de 100 pb; 2) control negativo; 3) dilución 10-1, 4) dilución 10-2; 5) dilución 10-3; 6) dilución 10-4, 7) dilución 10-5, 8) marcador ladder de 100 pb. ¿Cuáles serían las principales conclusiones?
El PCR permite detectar todos lo géneros de Listeria hasta un límite de detección de 10-5
El PCR solo detecta Listeria monocitogenes hasta un límite de detección de 10-1
El PCR permite detectar todos lo géneros de Listeria pero solo identifica Listeria monocitogenes
El PCR no presenta una banda definida requiere mayor estandarización
En un análisis de PCR para diagnóstico de salmonelosis, se evaluaron 5 muestras negativas las cuales fueron contaminadas intencionalmente con Salmonella typhi (*), mientras que otro grupo con E. coli (**). De la tabla mostrada se puede concluir que:
El PCR para diagnóstico de S typhi presenta 100% de sensibilidad analítica y 0% de especificidad
El PCR para diagnóstico de S typhi es altamente específico
El PCR para diagnóstico de S typhi presenta 50% de sensibilidad analítica y 50% de especificidad
El PCR para diagnóstico de S typhi presenta reactividad cruzada con E coli
Dos inconvenientes del PCR convencional en punto final con respecto al PCR en tiempo real:
Dificultad de determinar el límite de detección y las inespecificidad
Baja sensibilidad y el costo elevado
La difícil interpretación y el trabajo que demanda
Baja sensibilidad y mayor tiempo de procesamiento
El método colorimétrico con F-AuNP y NaCl (ver figura) podría ser implementado para:
Omitir el riesgo de contaminación con bromuro de etidio e incrementar la sensibilidad del PCR
Asegurar la amplificación del PCR Lamp y la presencia de inhibidores
Incrementar la sensibilidad del PCR en tiempo real y facilitar su interpretación
Identificar mutaciones puntuales de resistencia a drogas
En un sistema de PCR en tiempo real para dengue se observaron los siguientes resultados a partir de una muestra de plasma de paciente. ¿Cuáles son las conclusiones correctas? (DENV-4: ARN de virus dengue serotipo 4, DENV-1: ARN de virus dengue serotipo 1 y RNA IC: control ARN humano)
El paciente tiene co-infección con Virus dengue 1 y dengue 4
El paciente tiene una mayor carga viral de Virus dengue 4 que de virus dengue 1
El paciente no tiene ARN humano en plasma
El resultado es inválido
A un especialista le consultaron evaluar el diseño de un laboratorio para diagnóstico molecular, sin embargo se identificó un inconveniente. Indique cuál es.
El área de extracción carece de refrigeradora y estufa
El área de amplificación debe tener comunicación directa con el área de electroforesis
No existe inconvenientes
Podrían haber problemas de contaminación por amplicones
¿Qué criterio se debe tomar en cuenta para evaluar lel desempeño de una sonda utilizada para el diagnóstico molecular por PCR en tiempo real por el método Taqman?
Que asegure la amplificación del fragmento de interés
Que haya un buen anclaje de la región 5'
Que tenga un quencher anclado en los primers forward y reverse
Que haya un buen anclaje de la región 3'
Para un ensayo RT-PCR en tiempo real que me permita determinar el número de copias de un agente infeccioso, se requiere:
Buffer de reacción, magnesio, primers, sonda y ADN
Buffer de reacción, magnesio, primers, ADN polimerasa, dNTPs, ADN
Control positivo de amplificación
Control de normalización
Para el diagnóstico inicial de SARS-CoV2 en pacientes sospechosos, los investigadores utilizaron primers universales que les permitió saber que se trataba de un coronavirus. Mencione qué tipo de sensibilidad presenta este sistema de PCR
Analítica
Selectiva
Inclusiva
Exclusiva
