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WorksheetsQuiz trenamento pcr tempo real
Total questions: 20
Worksheet time: 7mins
Qual é a principal vantagem da qPCR em relação à sorologia na fase aguda da doença de Chagas?
Detectar rapidamente anticorpos IgM específicos.
Detectar o DNA do parasita e, portanto, a infecção ativa.
Substituir a necessidade de estudos clínicos.
Medir a resposta imune celular.
O que um valor de Ct muito alto (por exemplo, Ct 39) indica em uma qPCR com curvas corretas e controles adequados?
Carga parasitária muito alta.
Certeza de um resultado negativo.
Possível carga baixa ou próxima ao limite de detecção.
Inibição completa da reação.
Um NTC (no template control) apresenta amplificação. Qual é a interpretação mais provável?
Todas as amostras são negativas.
Excelente eficiência do ensaio.
Inibição das amostras.
Contaminação por amplicons ou reagentes contaminados.
Em uma curva padrão ideal, qual seria a inclinação aproximada associada a 100% de eficiência?
-3,322
-1,0
+3,322
0,0
O que representa o controle interno de amplificação (IAC) em uma reação de qPCR?
Um controle para detectar contaminação externa.
Um marcador para identificar a espécie do parasita.
Um controle para verificar se a extração e a PCR não estão inibidas.
Um substituto para o controle positivo.
Qual das seguintes é uma causa comum de inibição da PCR em amostras de sangue?
Presença de heparina como anticoagulante.
Uso de pontas de filtro.
Resfriamento adequado do sistema.
Uso de sondas TaqMan.
O que indica uma curva de fusão com mais de um pico?
Produto único e específico.
Presença de produtos não específicos ou dímeros.
Controle negativo perfeito.
Saturação do sinal.
Se a inclinação de uma curva padrão for -4,0, o que isso implica conceitualmente?
Eficiência de 100% (possível pipetagem errônea).
R² perfeito (1,0).
Reação sem interesse diagnóstico.
Qual é a vantagem de usar sondas TaqMan em vez de SYBR Green para diagnóstico?
Menor custo.
Não é necessário termociclador.
Evitam a necessidade de controles.
Maior especificidade e possibilidade de multiplexação.
Qual ação você tomaria primeiro se várias réplicas tivessem valores de Ct muito diferentes?
Alterar o alvo molecular.
Publicar imediatamente os dados.
Ignorar e calcular a média do Ct.
Revisar a técnica de pipetagem e mistura.
Qual é a principal utilidade de incluir uma curva padrão em cada execução?
Aumentar o número de amostras por execução.
Permitir a quantificação absoluta de cópias em amostras desconhecidas.
Substituir os controles internos.
Evitar a necessidade de NTC.
Na interpretação clínica, por que um único resultado de qPCR não é suficiente para considerar um paciente "curado"?
Porque o Ct não pode ser interpretado.
Porque a qPCR nunca é específica.
Porque a qPCR pode detectar DNA residual não viável após o tratamento.
Porque os resultados da qPCR são sempre falsos positivos.
Qual das seguintes práticas é mais eficaz para evitar a contaminação do amplicon?
Trabalhar pós-PCR na mesma área que o pré-PCR.
Fluxo unidirecional e áreas separadas (pré, PCR, pós).
Não usar controles na execução.
Reutilizar alíquotas abertas.
Para avaliar se um ensaio de qPCR está pronto para a rotina clínica, qual é a combinação mínima de parâmetros a serem validados analiticamente?
Cor do reagente e marca do termociclador.
Eficiência.
Sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade.
Data de compra dos reagentes.
O que indica um valor de R² da curva padrão igual a 0,88?
Baixa linearidade
Excelente linearidade.
Reprodutibilidade perfeita.
Não há necessidade de repetir a curva.
Na leishmaniose cutânea, qual amostra geralmente apresenta maior sensibilidade para a PCR na detecção do parasita?
Sangue periférico sempre.
Aspirado ou biópsia da lesão.
Saliva.
Urina.
Qual medida é típica de um laboratório BSL-3?
Cabines de biossegurança II
Áreas separadas de pré e pós-PCR
Pressão negativa e portas duplas
Somente luvas e aventais são necessários.
Se, em uma execução, a maioria das amostras apresentar IAC com Ct deslocado (por exemplo, +5 ciclos em relação ao valor esperado), o que isso indica?
A eficiência da reação é ótima.
Controle positivo degradado.
A amostra tem maior carga de DNA.
Possível inibição generalizada.
Qual é a utilidade do qPCR digital (dPCR) em relação ao qPCR tradicional?
Exige menos validação.
Oferece quantificação absoluta sem curva padrão e maior sensibilidade em cargas baixas.
É mais barato e mais rápido.
Produz menos dados.
Qual medida de gerenciamento da qualidade demonstra a comparabilidade entre laboratórios?
Uso da mesma marca de pipetas.
Ter o mesmo chefe técnico em todos os laboratórios.
Participação em programas de avaliação externa.
Usar os mesmos reagentes em PCR.
