WorksheetsTema 23. Técnicas Inmunoenzimáticas
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Worksheet time: 37mins
¿Qué tipo de inmunidad utiliza receptores para reconocer microorganismos invasores extraños y generar memoria para ataques futuros?
Inmunidad innata
Inmunidad adquirida
Respuesta humoral
Respuesta mediada por células
¿Qué tipo de respuesta inmune se basa en la producción de anticuerpos por los linfocitos B?
Respuesta mediada por células
Respuesta humoral
Inmunidad innata
Respuesta inespecífica
¿Qué característica define la interacción antígeno-anticuerpo en las técnicas inmunológicas?
Reversibilidad y enlaces covalentes
Especificidad y enlaces no covalentes
Reactividad cruzada y enlaces covalentes
Complementariedad y enlaces covalentes
¿Cómo se denomina la respuesta inmune que destruye células infectadas o anómalas mediante células especializadas?
Respuesta humoral
Respuesta mediada por células
Inmunidad adquirida
Respuesta inespecífica
¿Qué término se utiliza para describir una sustancia extraña capaz de estimular la respuesta inmune del organismo?
Anticuerpo
Antígeno
Linfocito
Enzima
¿Qué mide una prueba de unión primaria en técnicas serológicas?
La formación de inmunocomplejos.
La unión directa entre Ag y Ac.
El efecto protector de los anticuerpos en un animal.
Los cambios físicos tras la formación de inmunocomplejos.
¿Qué técnica utiliza un marcador fluorescente para hacer visible la unión Ag-Ac?
Radioinmunoanálisis (RIA).
Inmunocromatografía.
Inmunofluorescencia.
Técnicas inmunoenzimáticas.
¿Qué proceso es necesario para realizar el marcado molecular sin alterar la unión Ag-Ac?
Filtración molecular o separación en gradiente de densidad.
Agitación mecánica de la muestra.
Calentamiento de la molécula marcada.
Adición de reactivos químicos agresivos.
¿Qué mide una prueba terciaria en técnicas serológicas?
La unión directa entre Ag y Ac.
Los cambios físicos tras la formación de inmunocomplejos.
El efecto protector real de los anticuerpos en un animal.
La interacción molecular entre Ag y Ac.
¿Qué tipo de diagnóstico se realiza mediante la detección de Ac presentes en diferentes matrices como suero o leche?
Diagnóstico directo.
Diagnóstico indirecto.
Diagnóstico molecular.
Diagnóstico enzimático.
¿Cuál es el propósito de las incubaciones intermedias en las técnicas primarias?
Generar fluorescencia en el resultado.
Producir la reacción Ag-Ac.
Evitar la formación de inmunocomplejos.
Facilitar el uso de enzimas conjugadas.
¿Qué técnica inmunológica utiliza enzimas en lugar de marcadores radiactivos y es más segura y menos costosa?
Western Blotting.
Inmunomarcación.
ELISA.
RIA.
¿Cuál de las siguientes enzimas es comúnmente utilizada en las técnicas inmunoenzimáticas?
Peroxidasa de rábano.
Amilasa.
Lipasa.
Proteasa.
¿Qué material se utiliza en los inmunoensayos ELISA para inmovilizar los inmunocomplejos?
Microplacas de poliestireno con pocillos de fondo plano.
Tubes de ensayo de vidrio.
Placas de cerámica.
Superficies de metal.
¿Cómo se determina la concentración de Ag o Ac en los inmunoensayos ELISA?
Por medio de un espectrofotómetro o un colorímetro.
Por observación visual directa.
Por análisis microscópico.
Por comparación con una muestra estándar.
¿Cuál es el primer paso en un ensayo ELISA según el tipo de ELISA?
Adición del conjugado marcado con la enzima.
Tapizado del pocillo con Ag o Ac.
Lavado del pocillo para eliminar el material no unido.
Unión del sustrato a la enzima.
¿Qué se utiliza para leer el resultado obtenido en los pocillos durante un ensayo ELISA?
Microscopio.
Pipetas de precisión.
Equipos de lectura fotométrica.
Controles positivos y negativos.
¿Cuál es la función de los controles positivos y negativos en un ensayo ELISA?
Automatizar las etapas del ensayo.
Validar el ensayo y calcular valores relativos.
Detectar el antígeno inmovilizado.
Clasificar los tipos de ELISA.
¿Cómo se clasifica un ELISA directo?
Como el más complejo de todos los ELISA.
Como el más simple y rápido de todos los ELISA.
Como el único que utiliza controles negativos.
Como el único que no requiere enzimas.
¿Cuál es el procedimiento simplificado del ELISA directo?
El antígeno se inmoviliza sobre una placa.
El antígeno se une al sustrato.
El anticuerpo se marca con una enzima.
El pocillo se lava para eliminar el exceso de enzima.
¿Cuál es el propósito principal del método ELISA indirecto?
Detectar y cuantificar un antígeno específico.
Identificar anticuerpos específicos frente a un antígeno.
Medir la intensidad de color en una muestra.
Analizar proteínas virales en una solución.
¿Qué tipo de muestra se utiliza comúnmente en el método ELISA indirecto?
Suero.
Agua destilada.
Sangre completa.
Solución salina.
¿Qué ocurre durante la incubación en el método ELISA indirecto si la muestra contiene anticuerpos específicos?
Los anticuerpos se disuelven en la solución.
Los anticuerpos se unen al antígeno en el fondo del pocillo.
Los anticuerpos se eliminan durante los lavados.
Los anticuerpos cambian de color.
¿Cómo se evidencia la presencia de conjugado inmovilizado en el método ELISA indirecto?
Por la formación de burbujas en el pocillo.
Por la generación de una reacción enzimática que produce color.
Por la eliminación de anticuerpos no unidos.
Por la absorción de luz en el pocillo.
¿Cuál es la principal diferencia entre el método ELISA indirecto y el ELISA tipo sándwich?
ELISA indirecto detecta antígenos, mientras que ELISA sándwich detecta anticuerpos.
ELISA indirecto utiliza suero, mientras que ELISA sándwich utiliza sangre completa.
ELISA indirecto detecta anticuerpos, mientras que ELISA sándwich detecta antígenos.
ELISA indirecto utiliza placas de poliestireno, mientras que ELISA sándwich utiliza vidrio.
¿Qué significa la técnica ELISA de competencia y cuál es su propósito principal?
Es una técnica que utiliza un antígeno de referencia para competir con el antígeno de la muestra por unirse al anticuerpo primario, y se emplea para detectar cantidades bajas de analitos de interés.
Es una técnica que utiliza anticuerpos marcados para identificar bacterias en muestras biológicas.
Es una técnica que mide la intensidad de la luz emitida por una reacción química.
Es una técnica que utiliza anticuerpos para bloquear la reacción de antígenos en muestras.
¿Cuál es la relación entre la cantidad de antígeno marcado unido al pocillo y la concentración de antígeno en la muestra problema en la técnica ELISA de competencia?
Es directamente proporcional.
Es inversamente proporcional.
No tiene relación.
Depende de la cantidad de anticuerpos presentes.
¿Qué ventaja tiene la técnica ELISA de competencia en comparación con otras pruebas ELISA?
Es más rápida y puede ser más sensible si se permite que el antígeno de la muestra reaccione con el anticuerpo antes de añadir el antígeno marcado.
Es más económica y requiere menos reactivos.
Es más precisa en la detección de bacterias.
Es más adecuada para muestras grandes.
¿Qué alternativa existe actualmente para sustituir el conjugado antiespecie en la técnica ELISA de competencia?
Utilizar proteína A o G marcada con peroxidasa.
Utilizar anticuerpos monoclonales.
Utilizar un antígeno fluorescente.
Utilizar un marcador de luz.
¿Qué característica principal tiene la técnica de quimioluminiscencia en ELISA?
Produce luz durante reacciones químicas y es muy sensible para mediciones de absorbancia.
Utiliza marcadores fluorescentes para detectar antígenos.
Emplea anticuerpos monoclonales para bloquear reacciones.
Es menos sensible que otras técnicas ELISA.
¿Qué tipo de reacción se utiliza en lugar del sustrato cromógeno en las pruebas ELISA ordinarias para generar luz?
Reacción de quimioluminiscencia
Reacción de oxidación de luminol por H2O2 y HRP
Reacción de fluorescencia
Reacción de fotoluminiscencia
¿Cuál es la ventaja principal de las pruebas de quimioluminiscencia sobre las cromógenas en las técnicas ELISA?
Mayor sensibilidad
Menor costo
Mayor rapidez
Menor complejidad técnica
¿Cuál es el límite de detección que puede incrementarse al cambiar un sustrato cromógeno por un luxógeno?
5 veces
10 veces
50 veces
200 veces
¿Qué técnica ELISA permite determinar tanto anticuerpos como antígenos mediante la comparación con curvas estándar?
ELISA indirecto
ELISA en sándwich
ELISA competitivo
ELISA directo
¿Qué permite detectar la prueba ELISPOT?
La cantidad de anticuerpos en una población celular.
La cantidad de antígenos en una población celular.
El número de células que producen anticuerpos específicos contra un antígeno.
La cantidad de moléculas secretadas por las células.
¿Qué se utiliza para el revelado en la prueba ELISPOT?
Un anticuerpo marcado con fluorescencia.
Un sustrato cromógeno o luxógeno adecuado.
Un marcador de proteínas.
Un reactivo de tinción celular.
¿Cuál es la opción más económica para la lectura de resultados en la prueba ELISPOT?
Lectores de microplacas.
Comparación visual.
Espectrofotómetros ELISA.
Colorímetros automáticos.
¿Por qué es importante homogeneizar el contenido de los pocillos antes de la lectura?
Para evitar la contaminación de los pocillos.
Porque los colorímetros de microplaca solo leen el centro exacto del pocillo.
Para mejorar la reacción entre antígenos y anticuerpos.
Porque los lectores de microplacas requieren agitación constante.
¿Qué mide un espectrofotómetro ELISA?
La cantidad de luz transmitida o absorbida por una muestra en diferentes longitudes de onda.
La temperatura de una muestra en diferentes condiciones.
La velocidad de reacción de una muestra química.
La densidad de una muestra sólida.
¿Cuál es el rango de iluminación de tungsteno que utiliza un lector de microplacas?
De 200nm a 500nm.
De 400nm a 700nm.
De 600nm a 900nm.
De 100nm a 300nm.
¿Qué componente de los espectrofotómetros permite separar el espectro de iluminación y proporcionar un haz de energía a una longitud de onda determinada?
El detector.
El lector de microplacas.
El monocromador.
La fuente de iluminación.
¿Cuál es la función principal del detector en los espectrofotómetros ELISA?
Transformar la señal recibida en señal eléctrica.
Proporcionar iluminación de tungsteno.
Separar el espectro de iluminación.
Calibrar la escala fotométrica.
¿Cuáles son las dimensiones aproximadas de una microplaca utilizada en los espectrofotómetros ELISA?
10cm por 6cm.
12.5cm por 8.5cm.
15cm por 10cm.
8cm por 5cm.
¿Qué contienen las columnas de algunos modelos de microplacas para la calibración de la escala de longitud de onda?
Un filtro de óxido de holmio.
Un filtro de tungsteno.
Un filtro de carbono.
Un filtro de silicio.
¿Qué técnica se utiliza para identificar una proteína específica en una mezcla compleja de proteínas?
Southern Blotting
Northern Blotting
Western Blotting
Electroforesis en gel
¿Cuál es el agente utilizado en el gel de SDS-poliacrilamida para la separación de proteínas?
Dodecilfosfato sódico (SDS)
Ácido sulfúrico
Nitrociclosa
Anticuerpos marcados
¿Qué se transfiere a la membrana de nitrocelulosa durante la segunda etapa del Western Blot?
Fragmentos de ADN
Bandas de proteínas
Antígenos
Complejos Ag-Ac
¿Qué método se utiliza en la tercera etapa del Western Blot para identificar proteínas específicas?
Electroforesis en gel
Análisis inmunoenzimático
Southern Blotting
Separación por peso molecular
¿Qué se añade a la membrana para evitar la unión no específica de anticuerpos?
Antígenos marcados
Anticuerpos bloqueadores
Solución de antiglobulina
Sustrato cromógeno
¿Qué compuesto puede aumentar la sensibilidad en la visualización de proteínas en el Western Blot?
Sustrato cromógeno
Compuesto quimioluminiscente
Gel de SDS-poliacrilamida
Anticuerpos marcados
¿Qué procedimiento se utiliza para determinar la posición de un anticuerpo radiactivo unido a una proteína de interés en un análisis de radioinmunoensayo?
Autoradiografía
Electroforesis en gel de poliacrilamida
Transferencia a nitrocelulosa
Inmunoprecipitación
¿Cuál es el propósito de la técnica de Western Blotting?
Identificar un anticuerpo específico en una mezcla
Separar proteínas por su peso molecular
Detectar la presencia de ADN en una muestra
Realizar una reacción en cadena de la polimerasa
¿Qué tipo de anticuerpo se utiliza para detectar la reacción de un anticuerpo con una banda en la técnica de Western Blotting?
Anticuerpo secundario radiomarcado o ligado a enzima
Anticuerpo primario no marcado
Anticuerpo monoclonal sin modificación
Anticuerpo policlonal no radiomarcado
¿Qué material se utiliza para transferir las bandas separadas de antígenos en la técnica de Western Blotting?
Nitrocelulosa
Poliacrilamida
Papel de filtro
Gel de agarosa
¿Qué técnica utiliza una membrana de nitrocelulosa para detectar la presencia de antígenos mediante puntos coloreados?
Western blot
Dot blot
ELISA
PCR
¿Cuál es el propósito principal de la técnica de dot blot en el análisis de proteínas?
Identificar la secuencia genética de un antígeno
Detectar la presencia de proteínas específicas mediante puntos coloreados
Purificar proteínas mediante centrifugación
Analizar la estructura tridimensional de proteínas
¿Cuál de los siguientes ensayos se realiza para detectar proteínas priónicas resistentes en el sistema nervioso central de bovinos?
ELISA
Western blot
PCR
Dot blot
¿Qué método se utiliza para discriminar cepas de EEB mediante la purificación de proteínas priónicas resistentes?
Método CEA
PCR
ELISA
Western blot
¿Qué ensayo se utiliza para detectar anticuerpos frente al virus de la Peste Porcina Africana (PPA)?
ELISA
Western blot
PCR
Dot blot
¿Qué técnica utiliza inmunoglobulinas marcadas con enzimas para localizar antígenos específicos en cortes de tejido?
Inmunohistoquímica (IHQ)
Electroforesis
PCR (Reacción en cadena de la polimerasa)
Microscopía electrónica
¿Cuál es la enzima más utilizada en la técnica de inmunohistoquímica?
Peroxidasa de rábano picante
Fosfatasa ácida
Lipasa
Amilasa
¿Qué tipo de cromógeno adquiere un color marrón por acción del marcador enzimático en la técnica de inmunohistoquímica?
Diaminobenzidina
Cloronaftol
Aminoetilcarbazol
Hemoglobina
¿Qué ventaja tiene la técnica indirecta sobre la inmunofluorescencia?
Los tejidos teñidos pueden examinarse con un microscopio óptico
Es más rápida que la técnica directa
No requiere el uso de anticuerpos secundarios
Utiliza menos reactivos químicos
¿Qué compuesto se empleó inicialmente en los métodos indirectos de inmunohistoquímica?
Peroxidasa-antiperoxidasa (PAP)
Diaminobenzidina
Fosfatasa alcalina
Cloronaftol
¿Cuál es el propósito de aplicar tratamientos complementarios en cortes histológicos según el texto?
Resaltar la reacción inmunológica específica.
Reducir la actividad peroxidásica endógena.
Facilitar la unión de anticuerpos primarios.
Eliminar la tinción de fondo.
¿Qué solución se utiliza para bloquear la actividad peroxidásica endógena?
Metanol y peróxido de hidrógeno al 0,3%.
Ácido clorhídrico y ácido peryódico.
Formal para la fijación.
Complejo avidina-biotina-peroxidasa.
¿Qué problema puede surgir debido a la tinción de fondo?
Dificultades para delimitar correctamente las áreas positivas.
Bloqueo de sustancias de estructura afín.
Producción de resultados falsos positivos.
Amplificación de la reacción inmunológica.
¿Qué característica hace que la biotina sea adecuada para el método del complejo avidina-biotina-peroxidasa?
Su bajo peso molecular.
Su afinidad con la avidina.
Su capacidad para amplificar la reacción.
Su resistencia a la tinción de fondo.
¿Cuál es una ventaja importante del método del complejo avidina-biotina-peroxidasa?
Ahorro de reactivos.
Reducción de la actividad peroxidásica.
Eliminación de la tinción de fondo.
Bloqueo de sustancias de estructura afín.
¿Cuál es la función principal del método indirecto en las técnicas inmunohistoquímicas?
Incrementar la cantidad de antígeno en el tejido.
Saturar los sitios de unión inespecífica con una proteína como la albúmina de suero bovino.
Reducir la intensidad de la señal frente al antígeno.
Eliminar la necesidad de usar anticuerpos secundarios.
¿Qué producto insoluble y coloreado se forma como resultado de la reacción de la peroxidasa en las técnicas inmunohistoquímicas?
Diaminobencidina y agua.
Diaminobencidina y peróxido de hidrógeno.
Diaminobencidina y un producto insoluble visible con microscopio óptico.
Albúmina y fosfato.
¿Cuál de las siguientes aplicaciones se realiza en los laboratorios de sanidad animal del Ministerio?
Diagnóstico de enfermedades genéticas humanas.
Diagnóstico de encefalopatías espongiformes transmisibles (EETs) mediante inmunohistoquímica.
Detección de anticuerpos frente al virus de la gripe aviar.
Diagnóstico de enfermedades cardiovasculares en animales.
¿Qué técnica se utiliza para la detección de anticuerpos frente al virus de la Peste Porcina Africana (PPA)?
Inmunohistoquímica de ABC.
Inmunohistoquímica mediante inmunoperoxidasa.
Diagnóstico molecular.
Análisis de proteínas.
¿Qué enfermedad se diagnostica mediante inmunohistoquímica de ABC en los laboratorios de sanidad animal?
Tuberculosis.
Peste Porcina Africana.
Encefalopatías espongiformes transmisibles.
Gripe aviar.
