Спеціальна технологія

Підготовка посуду для хіміко-бактеріологічних дослідження та його зберігання. Методи стерилізації

​

Розробила викладач спеціальних предметів

спеціаліст І категорії

Херсонського професійного ліцею харчової промисловості​

Бєля Оксана Вікторівна

​План уроку

• Підготовка посуду для мікробіологічних досліджень​

• ​Стерилізація. Види стерилізації.

• ​Дезінфекція. Основні групи дезінфектантів.

• ​Антисептики. Основні групи антисептиків.

​Стерилізація

​Стерилізація – один з найважливіших прийомів у мікробіологічній практиці.

• В практичній роботі стерилізацію трактують, як методи які застосовують для знищення всіх форм життя як на поверхні, так і всередині об’єктів стерилізації.

• Стерилізують живильні середовища, посуд, інструменти з метою не допустити розвитку сторонніх мікроорганізмів у досліджуваних культурах.

• Термін, упродовж якого матеріал залишається стерильним, обмежений, тому на етикетці вказують дату та час стерилізації.

• Посуд, інструменти й інші матеріали, загорнуті в щільний папір, мають термін зберігання 30 діб після стерилізації, не загорнутий посуд і інструменти можуть бути використані протягом поточного робочого дня.​

Алгоритм «Підготовка градуйованих піпеток до стерилізації»

•   Нарізати смужки паперу розміром 2-2,5×50-70 см.

•  Розсортуйте за об'ємом чисті сухі піпетки.

• ​Вставте у тупий кінець піпетки вату і спаліть надлишки вати у полум’ї пальника.

• Загорніть щільно кожну піпетку в смужку паперу, починаючи з тупого кінця.

•   Підготуйте аркуш щільного паперу розміром приблизно 30×40см.

• Загорніть в одну упаковку 15-30 загорнутих піпеток в одному напрямку.

• Пакувальний папір закріпіть шпагатом.

• Напишіть на пакувальному папері дату стерилізації, вкажіть кількість і об'єм піпеток

​Алгоритм «Підготовка пробірок до стерилізації»

​1.      Розсортуйте вимиті сухі пробірки за обємом.

2.      Закрийте ватно-марлевими корками пробірки.

Увага! Пробки підбирайте так, щоб 2/3 пробки знаходились у пробірці, а 1/3 – поза пробіркою. Пробка повинна щільно прилягати до стінок пробірки. Якщо не дотримуватися цих правил, пробки легко випадають із пробірок. Це призводить до того, що пробірки втрачають стерильність.

3.      Зв'яжіть шпагатом по 5-20 штук.

4.      Напишіть дату стерилізації на листочку паперу 3×3 см.

Підведіть цей папірець під шпагат на пробірках.

​Алгоритм «Підготовка чашок Петрі до стерилізації»

​1.      Вимийте та висушіть чашки Петрі.

2.      Розстеліть на столі аркуш крафтового паперу (розмір 40×40 см).

3.      Складіть чашки Петрі стовпчиком в одному напрямі (дном догори) - 10 шт.

4.      Покладіть на аркуш паперу цей стовпчик чашок набік і щільно загорніть папером.

5.      Обв'яжіть шпагатом.

Напишіть на пакувальному папері дату стерилізації.

​Алгоритм «Підготовка флаконів, колб до стерилізації»

1. ​ Закрийте миті та сухі флакони ватно-марлевими корками, обгорнутими фольгою.

2. Надягніть поверх корка паперовий ковпачок.

3. Закріпіть паперовий ковпачок шпагатом.​

4. Зазначте дату стерилізації на папері ковпачка.

​Алгоритм «Підготовка інструментів»

​1.      Загорніть у щільний пакувальний папір одну одиницю інструментів.

2.      Напишіть на пакувальному папері дату стерилізації

Увага! Металеві інструменти (пінцети, шпателі, скальпелі, ножиці) готують до стерилізації однаково.​

Папір, вату, марлю стерилізують у сухожаровій шафі за температури 160ºС - 150 хв або в паровому стерилізаторі за температури 120ºС – 30 хв

Алгоритм «Підготовка паперу, марлі, вати»​

​1.      Наріжте фільтрувальний папір на серветки розміром 15×15 см, марлю - 5×5 см.

2.      Зробіть з вати кульки розміром 1×1 см.

3.      Загорніть у щільний пакувальний папір паперові серветки по 10 штук, шматочки марлі й кульки вати – по 1 шт.

4.      Загорніть у загальний пакувальний папір пакети з марлею, в інший – пакети з ватою.

Напишіть на пакувальному папері вид матеріалу, кількість, дату стерилізації.

​Алгоритм «Контролю якості  стерилізації за допомогою хімічних тестів»

  Підготуйте для контролю якості стерилізації кристалічні хімічні речовини з певною температурою плавлення:

-          бензонафтол — 110 °С;         антипірин — 113 °С;           резорцин, сірка — 119 °С;          бензойна кислота, бета-нафтол — 120 °С;        сечовина, фенацетин, манноза— 132 °С;           саліцилова кислота, стрептоцид — 160 °С;           тіосечовина, альбуцид — 180 °С.

Одну з цих речовин змішати із невеликою кількістю барвника (фуксину або метиленового синього) і помістити у скляну трубочку.

Трубочку запаюють на полум’ї газової горілки. 

Трубочки вміщують у стерилізаційні коробки разом із матеріалом, що стерилізується. Якщо температура в стерилізаційній камері сягає певного рівня, то хімічна речовина в трубочці розплавляється, змішується з барвником і забарвлюється в його колір.

  Увага! Нині випускають паперові індикатори стерилізації, які змінюють забарвлення за певної температури: 1С — 120ºС, 1С — 132°С  та ін.

​АСЕПТИКА

(a - заперечення, грецьк. septicos –гнійний)

Комплекс заходів, спрямованих на попередження проникнення мікроорганізмів на (в) певний об'єкт: операційне поле, бактеріологічний бокс, окремі виробничі приміщення, стерильний розчин або лікарський препарат.

Асептичні умови створюють за допомогою стерилізації, дезінфекції, антисептики.​

​ФАКТОРИ ЗОВНІШНЬОГО СЕРЕДОВИЩА, ЩО ВПЛИВАЮТЬ НА МІКРООРГАНІЗМИ

​1. Фізичні (температура, тиск, різні види випромінювань, ультразвук)

2. Хімічні (речовини, що діють бактеріостатично або бактерицидно)

3. Біологічні (живі організми: різні види мікро- і макроорганізмів)

​МЕТОДИ СТЕРИЛІЗАЦІЇ

​• Механічні

• Фізичні

• Хімічні

МЕХАНІЧНІ МЕТОДИ СТЕРИЛІЗАЦІЇ (ФІЛЬТРУВАННЯ)​

​Об'єкти стерилізації:

розчини термолабільних речовин (білки, сироватки,вітаміни, лікарські препарати (за ДФУ).

Діаметр пор фільтру не більше 0,3 мкм

​ФІЗИЧНІ (ТЕРМІЧНІ ) МЕТОДИ СТЕРИЛІЗАЦІЇ

​1. Автоклавування (насиченою парою під тиском)

2. Текучою парою

3. Тиндалізація

4. Сухим жаром

5. В полум‘ї пальника

АВТОКЛАВУВАННЯ​

​Стерилізуючим агентом є водяна пара під надлишковим тиском Ефективність стерилізації досягається тільки при одночасному поєднанні:

• необхідної температури,

• достатнього тиску,

• часу дії.

​РЕЖИМИ ПАРОВОЇ СТЕРИЛІЗАЦІЇ

​• 132 °C —2 атмосфери —20 хв—основний режим.

Стерилізують всі вироби (скло, метал, текстиль, крім гумових).

• 120 °C —1,1 атмосфера—45 хв—щадний режим. (скло, метал, гумові вироби, полімерні вироби—згідно паспорту, текстиль)

• 110 °C —0,5 атмосфери—180хв—особливо щадний режим (нестійкі препарати, поживні середовища)

​МЕТОДИ БАГАТОКРАТНОЇ (ДРОБНОЇ) СТЕРИЛІЗАЦІЇ

​Стерилізацію проводять багатократно, щоб позбутися спорових форм бактерій.

ТЕКУЧОЮ ПАРОЮ

Режим 100 ºС і нижче 30 хв. 3 рази. Використовують автоклав з привідкритою кришкою або апарат Коха. Об'єкти стерилізації - розчини з вуглеводами, вітаміни, молоко та ін. матеріали, що змінюють властивості при температурі вище 100ºС.

​ТИНДАЛІЗАЦІЯ

Режим при 60-65ºС 5 разів при 70-80ºС 3 рази по 60 хв. Використовують водяну баню. Об'єкти стерилізації - речовини, що денатуруються при температурі 100ºС (вітаміни, деякі очні краплі та ін).

​СТЕРИЛІЗАЦІЯ СУХИМ ЖАРОМ

(Повітряна стерилізація) сухожарова шафа

​Режим стерилізації:

180°С - 60 хв;

або 160°С - 120 хв.

Об'єкти стерилізації:

Термостійкі порошки (натрія хлорид, оксид цинку, тальк, біла цегла та ін.). Вироби із скла, металів, силіконової гуми, фарфору.

​

​СТЕРИЛІЗАЦІЯ В ПОЛУМ‘Ї ПАЛЬНИКА

​• Режим стерилізації:

Температура 156ºС.

• При прокалюванні згорають вегетативні і спорові форми мікроорганізмів

• Об'єкти: бактеріальні петлі, пінцети, предметне скло, деякі інструменти (голки, крючки, лопаточки).

​ПАСТЕРИЗАЦІЯ

​спосіб температурної обробки, при якому інактивується більшість вегетативних форм бактерій, але спори залишаються.

• Низька пастеризація –60-70ºС 20-30 хв

• Висока пастеризація –72ºС 15-60 сек

• Миттєва пастеризація –90ºС декілька сек

• Ультрапастеризація–150ºС 0,75 сек

​ПРОМЕНЕВІ МЕТОДИ СТЕРИЛІЗАЦІЇ

​• УФ-стерилізація • Радіаційна

​ОБ'ЄКТИ УФ-СТЕРИЛІЗАЦІЇ

​• Поверхні • Повітря • Вода

​РАДІАЦІЙНА СТЕРИЛІЗАЦІЯ

​гама- абобета-випромінювання; ізотоп кобальту-60 абоцезію-137

Об'єкти стерилізації: Одноразові вироби із полімерних матеріалів, ріжучих інструментів, шовний и перев‘язувальний матеріал, деякі лікарські препарати.

​НА ЕФЕКТІ ДІЇ ХІМІЧНИХ РЕЧОВИН НА МІКРООРГАНІЗМИ ЗАСНОВАНІ

​• Хімічна стерилізація • Дезінфекція • Антисептика​

​ХІМІЧНА СТЕРИЛІЗАЦІЯ

• Газова («холодна»)• Плазмова • Хімічна стерилізація розчинами (пероксид водню, суміш пергідролю і мурашиної кислоти, біанол, гігасепт, аноліт)

​ГАЗОВА СТЕРИЛІЗАЦІЯ Стерилізуючі агенти - окис етилену, бромистий метил, їх суміш (ОБ), формальдегід, озоно-повітрянасуміш (тобто хімічні сполуки, що володіють безумовною спороцидноюдією). Об'єкти: термолабільні медичні вироби (ендоскопи, діалізатори, катетери та ін.).

Формальдегідний стерилізатор - установка «Формомат»

Стерилізація проводиться притемпературі 60 -80°С протягом 60 хв; загальна тривалість циклу- 3,5 год (включаючи дегазацію).​

​ПЛАЗМОВА СТЕРИЛІЗАЦІЯ

​• призначена для холодної стерилізації медичних інструментів, які містять термочутливікомпоненти. • Ці інструменти можуть також мати місця, дифузія до яких ускладнена, а саме, внутрішні поверхні щілин або довгі вузькі трубки. • Максимальна температура виробів, щостерилізуються- 60 °C• Тривалістьциклу обробки- 15-45 хв.

Прилад для холодної стерилізації медичних виробів плазмою тліючого розряду постійного струму (СГР-100)

ДЕЗІНФЕКЦІЯ (фр. des . – від, лат. infectio - зараження) ​

​Знищення патогенних і умовно –патогенних мікроорганізмів в об‘єктах зовнішнього середовища зметою розриву шляхів передачі збудників від джерела інфекції до сприйнятливих людей.

​ОСНОВНА ЗАДАЧА ДЕЗІНФЕКЦІЇ Припинення механізму передачі збудника знезараженням різних об'єктів (вода, поверхні, харчові продукти, повітря, предмети).

​АНТИСЕПТИКА

(грецьк. anti - проти, septicos –гнійний)

​Знищення патогенних або умовно-патогенних мікроорганізмів на шкірі або слизових оболонках макроорганізму.

Антисептика –це щадна дезінфекція стосовно людини.

КЛАСИФІКАЦІЯ АНТИСЕПТИКІВ І ДЕЗІНФЕКТАНТІВ​

​ Органічні:

Феноли, Барвники, Нітрофурани, 8-оксихіноліни,

Альдегіди, Спирти, Детергенти.

Неорганічні:

Галоїди, Окислювачі, Кислоти, Луги,

Солі важких металів.

Висновки​

​​ АСЕПТИКА

(a - заперечення, грецьк. septicos –гнійний)

Комплекс заходів, спрямованих на попередженняпроникнення мікроорганізмів на (в) певний об'єкт: операційне поле, бактеріологічний бокс, окремі виробничі приміщення, стерильний розчин або лікарський препарат.

Асептичні умови створюють за допомогою стерилізації, дезінфекції, антисептики.

Рекомендована література

​1. Мікробіологія: Підр. для студ. / І. Л.Дикий, І. Ю.Холупяк, Н. Ю. Шевельова, та ін. 2-е вид.–Х. : Профессионал, 2006. –433 с.

2. Микробиология: Руководство к лабораторным занятиям. Учеб. пособие для студентов высших учебных заведений / И.Л. Дикий, И.И Сидорчук, И.Ю. Холупяк, Н.Е. Шевелёва, М.М. Великая, Н.А. Волкова, Л.Ф. Силаева, О.П. Стрилец, О.Г. Гейдерих, В.Е. Литаров. –Х.: Изд-во НфаУ; Золотые страницы, 2002.- 444 с.

3. Микробиология. Методические рекомендации для студентов фармацевтических высших учебных заведений / И.Л. Дикий, И.Ю. Холупяк, М.М. Великая, Н.Е. Шевелева и др. –Х., 2004. –144 с.

ДЯКУЮ ЗА УВАГУ!​