Biocell - méthodes

Cochez les réponses vraies :

• 1. Cette technique permet de séparer, isoler et analyser des cellules.

• 2. Nous pouvons déterminer à quelle étape du cycle cellulaire est une cellule en se basant sur sa quantité d’ADN

• 3. Lorsque l’on analyse les cellules, on parle d’élutriation

• 4. Les critères de tri sont la taille, la fluorescence et la granulosité.

Cochez les réponses vraies :

• 1. Les éléments les plus lourds d’une cellule sont le noyau et se retrouvent donc dans le culot.

• 2. Après une ultracentrifugation nous avons le culot constitué des éléments les plus lourds et le surnageant des plus légers.

• 3. Après avoir centrifugé les noyaux puis les mitochondries puis les lysosomes, nous obtenons les ribosomes.

• 4. Cette technique sépare les éléments en fonction de la taille et de la charge.

Cochez les réponses vraies :

• 1. Dans la chromato échangeuse d’ions, il faut ajouter une éluant afin de détacher les molécules aux billes poreuses

• 2. Dans la filtration sur gel ce sont les grosses molécules qui sont éluées en premières

• 3.  Plus la molécule aura de l’affinité avec la phase stationnaire plus vite elle sera éluée

• 4. Dans la chromato par affinité ce sont les grosses molécules suivent la phase mobile

Cochez les réponses vraies :

• 1. Lors d’une electrophorese bi-dimensionelle, on sépare d’abord par le poids puis par la charge électrique.

• 2. Après une electrophorese, les molécules peuvent être réutilisées car la technique n’est pas dénaturante mais dite préservatrice.

• 3. Si on veut séparer les protéines par masse uniquement, on va privilégier la méthode SDS-PAGE.

• 4. Plus une protéine est petite, plus elle va migrer rapidement

Cochez les réponses vraies :

• 1. La phase Pulse consiste à appauvrir la cellule en précurseur normal pour l’enrichir en précurseur radioactif

• 2. Les cellules restent vivantes ce qui permet d’observer le mouvement des protéines radioactives.

• 3. Cette technique permet de localiser les protéines et leur fonctionnement

• 4. Nous avons besoins de plusieurs cellules fixées pour reconstituer le trajet d’une protéine.

L'hybridation in situ est une méthode qui permet de détecter l'ADN ou l'ARN dans une cellule à l'aide d'une sonde protéique

• VRAI

• FAUX

Answer explanation

sonde NUCLEIQUE

Cochez les réponse(s) vraie(s) : WB, NB, SB

• 1. Lors d’un western blot on utilise du SDS pour rompre les ponts disulfures

• 2. Le Southern blot s’effectue en un premier temps sur gel de polyacrylamide afin de détecter l’ADN

• 3. Le Northern Blot s’effectue en premier lieu sur du gel d’agarose afin de détecter l’ARN

• 4. La présence de témoin n’est pas primordiale si l’on connait bien la protéine étudier en western blot

Cochez les réponses vraies :

• 1. La réapparition de la fluorescence est due à la réparation de la protéine par la cellule.

• 2. Le photoblanchiment est la disparition de la fluorescence grâce à la lumière pointée sur une partie précise du cytoplasme.

• 3. La réapparition de la fluorescence permet d’estimer la vitesse du métabolisme de la cellule.

• 4. Si une protéine recommence à être lumineuse, cela signifie que la cellule a permit de la re-synthétiser.

Cochez les réponses vraies :

• 1. Nous utilisons des sondes complémentaires aux extraits d’ADN visés.

• 2. Lorsque la luminosité apparaît dans la cellule, cela signifie qu’il y a eu une hybridation entre la sonde et la cible.

• 3. La sonde doit être composée d’anticorps fluorescents afin de fonctionner.

• 4. La technique FISH permet d’étudier l’ADN mais aussi l’ARN pour observer les terrains d’expression des gènes.

Cochez les réponses vraies :

• 1. Lors d’une electrophorese bi-dimensionelle, on sépare d’abord par le poids puis par la charge électrique.

• 2. Après une electrophorese, les molécules peuvent être réutilisées car la technique n’est pas dénaturante mais dite préservatrice

• 3. Si on veut séparer les protéines par masse uniquement, on va privilégier la méthode SDS-PAGE.

• 4. Plus une protéine est petite, plus elle va migrer rapidement.