Unidad 6. Purificación de ácidos nucleicos

Mediante la técnica de Ficoll

• Se obtienen linfocitos y monocitos de la sangre para la extracción de ácidos nucleicos

• Se obtienen eritrocitos de la sangre para la extracción de ácidos nucleicos

• Se obtiene plasma y plaquetas para la extracción de ácidos nucleicos

• Ninguna es correcta

El pretratamiento de los cultivos celulares antes de la extracción de ácidos nucleicos consiste en...

• La recolección de las células y su homogeneización

• Su fluidificación mediante N-acetil-cisteína

• La recolección de las células y la eliminación del medio de cultivo

• La rehidratación de las células

Los métodos de homogeneización química implican

• El uso de un mortero y nitrógeno líquido

• El uso de aparatos de trituración mediante la adición a la muestra de esferas de vidrio o cerámica

• El uso de proteasas y detergentes que degradan los componentes tisulares

• Todas las opciones son correctas

El Dodecil Sulfato Sódico (SDS) sirve en la extracción de ácidos nucleicos para...

• Desestructurar membranas y desnaturalizar proteínas

• Inhibir la actividad de ADNasas atrapando los cationes de magnesio

• Inactivar las nucleasas

• Eliminar los polisacáridos de la pared celular, en caso de la extracción a partir de células vegetales

La liticasa sirve para

• Degradar la pared celular vegetal

• Degradar la pared celular de levaduras y hongos

• Degradar la pared celular de bacterias

• Ninguna es correcta

La cromatografía de intercambio iónico se basa en...

• la precipitación de proteínas en presencia de altas concentraciones salinas

• la distinta solubilidad de los compuestos que integran el lisado en solventes orgánicos

• la unión electrostática reversible de los iones en solución a

  los grupos funcionales cargados que están unidos covalentemente a una

  fase estacionaria.

• Se basa en la capacidad de

  adsorción de los ácidos nucleicos al

  vidrio y al sílice en presencia de sales caotrópicas

En la purificación de ácidos nucleicos con solventes orgánicos, ¿para qué se añade isopropanol frío a la fase acuosa?

• Para la eliminación de compuestos solubles en solventes orgánicos mediante centrifugación

• Para resuspender el ADN

• Para el lavado del ADN

• Para la precipitación del ADN

1. ¿Cómo se puede valorar el grado de integridad de los ácidos nucleicos?

• 1. Mediante espectrofotometría

• 1. Mediante fluorescencia

• 1. Mediante una electroforesis en gel de agarosa

• 1. Mediante el registro del pico máximo de absorbancia.

El método para purificar productos de PCR con un tamaño superior a 150pb es...

• La purificación mediante esferas magnéticas

• La ultrafiltración

• La cromatografía de intercambio iónico

• La precipitación con sales

Se considera que el ADN tiene un grado de pureza adecuado cuando el cociente A260/A280 tiene un valor entre:

• 1.7 y 2.0.

• 1.8 y 2.1.

• 1.5 y 2.2.

• 1.5 y 2.0.