Ayudantía 08/05

En relación a la fusión mitocondrial, seleccione las alternativas correctas

• Es un proceso secuencial en el que primero se fusiona la IMM y luego la OMM

• La fusión de la IMM depende de la proteína OPA1

• La acción de las mitofusinas permite el intercambio de componentes de la matriz

• La fusión de la OMM depende de las mitofusinas

En relación a la fisión mitocondrial, seleccione las alternativas correctas

• La proteína transmembrana Drp1 es necesaria para la fision

• Luego de que Drp1 es reclutado por receptores, el estrangulamiento de las membranas permite la fisión

• Los lugares de contacto entre ER y mitocondria indica donde ocurrirá la fisión

• La fisión es relevante para la mitofagia

En el estudio de B. Cartes-Saavedra et al. (https://doi.org/10.1073/pnas.2207471120) se estudia el efecto de las mutaciones de OPA1 en la estructura y dinámica mitocondrial. Para esto, se tienen fibroblastos que expresan OPA1 con una mutante en su dominio GTPasa o fibroblastos mutantes para el dominio GED de OPA1. Luego por microscopia confocal se evaluó la morfología mitocondrial definiendo tres fenotipos: Fragmentado, Intermedio y Elongado. Para cada una de las mutantes se cuantificó y clasificó las mitocondrias según los fenotipos. En relación a lo anterior ¿Que afirmaciones podrían explicar los resultados?:

• Las células que expresan la mutante GTPasa presentan una mayor cantidad de eventos de fusión y una menor o igual de fisión

• Las células que expresan la mutante GED presentan una mayor cantidad de eventos de fisión y una menor o igual de fusión

• Las células que expresan la mutante GTPasa presentan una mayor cantidad de eventos de fisión y una menor o igual de fusión

• Las células que expresan la mutante GED presentan una mayor cantidad de eventos de fusión y una menor o igual de fisión

En el mismo estudio, ahora se desea evaluar como las mutaciones de OPA1 afectan la cinética de la fusión mitocondrial. Para esto, se tienen dos poblaciones mitocondriales: Una población presenta solo un marcador para IMM (en verde) y otra población presenta solo un marcador para OMM (en rojo). En B y en C se específica como se miden los tiempos de fusión para cada membrana. En los gráficos de barra se especifica el tiempo de fusión para la IMM y la OMM en: Células WT, Células KO para OPA1 y células KO para OPA1 que expresan de forma aguda OPA1 (+WT), la mutante GED (OPA1c.2713C>T) o la mutante GTPasa (OPA1c.870+5G>A). En relación a los resultados, es correcto afirmar:

• La presencia de OPA1 mutante para GED provoca que los eventos de fusión ocurra más rápido

• Esta metodología no permite demostrar que la fusión mitocondrial es un evento secuencial

• La ausencia de OPA1 así como la expresión de su mutante GTPasa no permite que ocurran eventos de fusión

• La ausencia de OPA1 permite la fusión de la OMM pero no la de la IMM

En el mismo estudio, ahora se desea evaluar como las mutaciones de OPA1 afectan la cinética de la fusión mitocondrial. Para esto, se tienen dos poblaciones mitocondriales: Una población presenta solo un marcador para IMM (en verde) y otra población presenta solo un marcador para OMM (en rojo). En B y en C se específica como se miden los tiempos de fusión para cada membrana. En los gráficos de barra se especifica el tiempo de fusión para la IMM y la OMM en: Células WT, Células KO para OPA1 y células KO para OPA1 que expresan de forma aguda OPA1 (+WT), la mutante GED (OPA1c.2713C>T) o la mutante GTPasa (OPA1c.870+5G>A). ¿Qué se puede inferir de los resultados?

• El dominio GED de OPA1 es suficiente para que ocurra la fusión mitocondrial

• La presencia de OPA1 es indispensable tanto para que ocurran la fusión de la IMM y OMM

• El dominio GED de OPA1 no es necesario para que ocurran los eventos de fusión mitocondrial

• OPA1 no es necesaria para el proceso de fusión mitocondrial