Preguntas de Laboratorio de Biología

¿Cuál de los siguientes componentes de la PCR actúa como la ADN polimerasa termoestable encargada de sintetizar nuevas cadenas de ADN durante los ciclos de extensión?

• dNTP Mix, 2 mM each (mezcla de desoxinucleótidos)

• Primer Forward (T7‑promotor)

• DreamTaq Green DNA Polymerase con actividad de 5 U/μL que soporta las altas temperaturas necesarias para el proceso de PCR

• 10X DreamTaq Green Buffer

¿Cuál es el tiempo de duplicación aproximado de E. coli DH5α?

• 10 minutos

• 20 minutos

• 40 minutos

• 60 minutos

Seleccione la respuesta correcta: ¿Cuál es la función principal del hidróxido de sodio en el procedimiento de extracción de ADN plasmídico de Escherichia coli?

• Proporcionar un medio de cultivo adecuado para el crecimiento celular.

• Facilitar la lisis celular al romper las membranas y liberar el ADN.

• Actuar como un agente estabilizador que previene la degradación del ADN durante el proceso.

• Aumentar la solubilidad de las proteínas y facilitar su posterior eliminación.

¿Cuál de los siguientes reactivos se utiliza para seleccionar únicamente las células de E. coli que han incorporado exitosamente el plásmido durante el proceso de transformación?

• Glicerol

• Ampicilina

• NaCl

• CaCl₂

¿Qué función cumple el cloruro de calcio (CaCl₂) en la preparación de células competentes de E. coli DH5α?

• Actúa como fuente de nutrientes en el medio de cultivo

• Proporciona energía para la síntesis proteica

• Permite que la membrana celular se vuelva permeable al ADN plasmídico

• Sirve como marcador genético para confirmar la transformación

¿Cuál es la función principal de la enzima T4 DNA ligasa?

• Cortar el ADN en sitios específicos

• Sintetizar cadenas de ARN mensajero

• Unir fragmentos de ADN mediante enlaces fosfodiéster

• Separar proteínas durante la electroforesis

La contaminación puede darse durante el proceso de transformación de células competentes de E. coli DH5α, ¿cuál de las siguientes causas es la más probable que ocurra en este proceso?

• Presencia de bacterias competentes de otra cepa contaminante.

• Degradación del ADN plasmídico debido a temperaturas

• Excesivo E. coli DH5α debido a la incubación prolongada

• Inhibición de la transformación por la presencia de antibióticos en el medio de cultivo

Durante una reacción de PCR, ¿cuál de las siguientes afirmaciones describe correctamente el papel del paso de alineamiento (annealing)?

• Se realiza a temperaturas de 94-98 °C para separar las cadenas de ADN.

• Permite que la ADN polimerasa sintetice nuevas hebras de ADN a partir de los cebadores.

• Ocurre a temperaturas de 50-65 °C y permite que los cebadores se unan a las secuencias complementarias del ADN molde.

• Se realiza después de los 40 ciclos de amplificación para estabilizar el producto final.

¿Cuáles son las tres etapas fundamentales que ocurren durante una reacción convencional de PCR?

• Solo desnaturalización.

• Alineamiento y extensión.

• Desnaturalización y alineamiento.

• Desnaturalización, alineamiento y extensión.

Durante la preparación de medios de cultivo para la transformación de E. coli, ¿cuál es la función del agar en la formulación del medio sólido LB?

• Aporta nutrientes esenciales como nitrógeno y carbono para el crecimiento celular.

• Actúa como un agente antibacteriano para inhibir el crecimiento de microorganismos contaminantes.

• Permite la solidificación del medio, facilitando la visualización y aislamiento de colonias bacterianas individuales.

• Estabiliza el pH del medio durante la incubación a 37 °C.