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WorksheetsLa Técnica de la PCR
Total questions: 45
Worksheet time: 23mins
¿Qué es la PCR?
Reacción en cadena de la polimerasa
Es una reacción antígeno - anticuerpo
Es una reacción de aglutinación sobre látex
Es la clonación de una bacteria
Cómo se llama este equipo?
espectrofotómetro
pHmetro
termociclador
luminómetro
¿Cómo se llama la enzima que lleva a cabo la PCR?
termonucleasa
ADN polimerasa
ligasa
ADNasa
La PCR es
Una técnica de diagnóstico
Una proteina
Un virus
Una molécula
Entre los componentes de la PCR no se encuentra
ADN molde
Cloruro sódico
Taq polimerasa
Primers
En la PCR cuantitativa, el CT
Es el ciclo umbral
Es el método de amplificación
Es el nombre del termociclador
Ninguna es correcta
La PCR fue desarrollada por (a) , quien consiguió un premio novel
¿Por qué es importante el Mg en la mezcla de PCR?
Actúa como cofactor de la polimerasa
Permite a correcta unión de los primers al templete de DNA
No es importante
Favorece la desnaturalización del DNA
La temperatura de anillamiento tiene como objetivo:
Promover la desnaturalización del DNA
Generar las condiciones optimas para la polimerización de la hebra naciente
Favorecer la unión de los primers al DNA
Ninguna de las anteriores
En una electroforesis en gel de agarosa el DNA migra hacia el polo negativo
Verdadero
Falso
El SYBR Green se une a la hendidura menor del DNA y emite florescencia para la cuantificación durante una qPCR
Verdadero
Falso
En una PCR anidada:
Se utilizan más de un par de primers en simutáneo
Primero se amplifica un fragmento de DNA y luego otro fragmento al interior del primero
Se hacen variaciones en la temperatura de anillamiento durante el protocolo
Se puede cuantificar el DNA a medida que se amplifica
Cual de los siguientes reactivos se añaden a una premezcla de PCR (respuesta múltiple)
Taq Polimerasa
Buffer TAE x1
Bufer KCl
dNTPs
Sybr safe
A la hora de diseñar unos primers, se debe evitar:
Que su contenido GC sean entre el 40% y el 60%
Que su longitud sea entre 18 y 30 nucleótidos
Que formen estructuras secundarias
Que sus Tm sean similares
Para detectar mutaciones puntuales se utiliza
PCR a tiempo final
PCR a tiempo real
PCR anidada
PCR multiple
Las sondas TaqMan tinen acoplada una molécula Q que promueve la fluorescencia de una fluoróforo cuando están cerca
Verdadero
Falso
Una muliplex PCR permite amplificar más de un marcador en una sola reacción
Verdadero
Falso
La PCR es una reacción enzimática basada en
La replicación del ARN
La replicación del ADN
La transcripción
La traducción
Qué nombre reciben los oligonucleótidos monocatenarios cuya secuencia es complementaria de las regiones que flanquean el fragmento que se quiere amplificar
sonda
primers
ADN molde
secuencia diana
22. ¿Qué fase del ciclo básico de una PCR suele realizarse a una temperatura de entre 50ºC y 65ºC?
La hibridación de los cebadores con el ADN molde
La purificación de los cebadores
La desnaturalización del ADN molde
La extensión de los cebadores
22. Normalmente, ¿cuál es el volumen final de mezcla de reacción de una PCR?
De 10 a 40 µL
De 25 o 50 µL
De 45 o 70 µL
De 35 o 60 µL
En la electroforesis en gel de agarosa:
las moleculas de ADN con carga negativa irán hacia el polo positivo
las moleculas de ADN con carga negativa irán hacia el polo negativo
las moleculas de ADN con carga positiva irán hacia el polo negativo
as moleculas de ADN con carga positiva irán hacia el polo positivo
Respecto a la migración de las moleculas de ADN en un gel de agarosa
Migrarán más deprisa las de menor tamaño
Migraran más deprisa las de mayor tamaño
Migraran más deprisa las de mayor longitud
La migración solo depende del porcentaje de agarosa en el gel
¿ En qúe tipo de PCR los productos de amplificación son fluorescentes y se pueden cuantificar?
PCR multiple
PCR anidada
PCR a tiempo final
PCR a tiempo real
Para detectar ARN viral
RT-PCR
PCR anidada
PCR multiple
FISH
La cadena de nucleótidos cuya secuencia es complementaria de una secuencia que queremos detectar mediante hibridación se llama
sonda
secuencia diana
molde
antiparalela
¿Qué permite la PCR con transcripción inversa?
Amplificar varias secuencias simultáneamente
Realizar dos PCR consecutivas
Amplificar y detectar híbridos imperfectos
Amplificar y analizar moléculas de ARNm
Indica la FALSA sobre la mezcla de reacción de la PCR
Se utiliza ADN purificado de la muestra como molde
Se añaden primers para que la ADN polimerasa pueda empezar el copiado
Se añade la ADN polimerasa en primer lugar
Se pone la misma concentración de los cuatro dNTPs
¿En qué tipo de PCR se utilizan simultáneamente varios juegos de cebadores?
PCR a tiempo real
PCR convencional
PCR con transcripción inversa
PCR múltiple
Las características de la PCR a tiempo real respecto a otros tipos de PCR son
Aumenta el tiempo para la obtención de los resultados cualitativos
Resultados más subjetivos ya que utiliza la tinción de un gel de electroforesis
Permite la cuantificación de los amplicones dado que la intensidad de la fluorescencia es proporcial
Supone un mayor riesgo de contaminación por la manipulación extra que requiere la técnica
El equipo de la imagen sirve para...
Realizar una electroforesis
Separar moléculas de ADN por tamaños
Analizar los productos amplificados en una PCR
Todas son ciertas
El transiluminador es una fuente de luz infrarroja donde se coloca el gel de electroforesis para ver las bandas de ADN
Verdadero
Falso
¿Qué paso de la PCR se debe realizar a 95ºC?
La elongación
La hibridación
La desnaturalización
La polimerización
¿Qué aparato se utiliza para realizar la PCR?
(a)
¿Qué paso de la PCR se debe realizar a 72ºC?
La elongación
La hibridación
La desnaturalización
La polimerización
¿Qué tipo de PCR se utiliza para detectar varias mutaciones a la vez?
PCR asimétrica
PCR Nested
PCR Multiplex
PCR convencional
En esta técnica se utiliza un gel y dos cubetas cargadas eléctricamente.
Electroforesis
Secuenciación
PCR
Clonación de ADN
Es una técnica que permite amplificar la cantidad de ADN de la muestra que hemos obtenido.
PCR
Electroforesis
Secuenciación
Clonación
Selecciona la correcta:
Es aconsejable utilizar cebadores con menos de 15 bases.
Es aconsejable utilizar cebadores con secuencias complementarias intra e intermoleculares.
Es aconsejable utilizar cebadores cuya diferencia de Tm sea inferior a 5°C.
A temperaturas de hibridación menores que la Tm de los cebadores, …
Se obtiene mayor especificidad.
Disminuyen los productos no deseados.
Los cebadores hibridan más eficientemente
La velocidad de polimerización de la Taq polimerasa es de alrededor de…
20 nucleótidos por segundo.
60 nucleótidos por segundo.
120 nucleótidos por segundo.
Selecciona la FALSA:
El tiempo estándar de la fase de desnaturalización es de 15-30 segundos.
El tiempo estándar de la fase de hibridación es de 30-60 segundos
El tiempo estándar de la fase de extensión es de 20-40 minutos.
Selecciona una:
La amplificación de ADN requiere presencia de iones Mg2+.
La amplificación de ADN requiere presencia de iones Mn2+
Ambas son correctas.
En la siguiente figura se representan dos situaciones de la hibridación del cebador (rojo) a la cadena molde (negro):
¿En cuál de las situaciones la ADN polimerasa podrá realizar su actividad de elongación?
.En la situación A.
En la situación B.
En ninguna de las situaciones.
¿Cómo llevas el examen?
