NEW
Font size
WorksheetsDiamol UTS RB
Total questions: 40
Worksheet time: 3mins
Susunan kodon GGG membentuk asam amino….
Glysine
Methionine
Alanine
Serine
Tyrosine
Salah satu kekurangan penggunaan SYBR green dalam realtime PCR dibanding probe taqman adalah….
Nilai ct tidak terbaca
Tidak ada sinyal fluorescence
Tidak dapat membedakan target dengan non-specific DNA binding
Tidak berikatan dengan DNA
Tidak membentuk kurva sigmoid
Grafik di bawah ini adalah salah satu contoh analisis pada realtime PCR SYBR green yaitu….
Ct value
Melting curve
Kurva sigmoid
Denaturasi
DTm
Perhitungan Tm dari primer dilakukan dengan menggunakan rumus Tm = 4(G+C) + 2(A+T). Tm dari primer berikut: 5’ CTCGAGAGCAAAAGCAGG 3’ menggunakan rumus di atas adalah….
55°C
56°C
57°C
58°C
59°C
Pada gambar hasil elektroforesis di atas, panah menunjukkan pembentukan struktur sekunder yang disebut sebagai: ….
Tm
Dimer
non-specific band (pita amplifikasi tidak spesifik)
hairpin
Sisa primer
Hal yang perlu diperhatikan selain nilai ct dalam pembacaan hasil realtime PCR, yaitu….
Bentuk kurva sigmoid
Panjang band amplicon
Warna fluorescence
Suhu annealing
Lama siklus
Suhu annealing optimum untuk PCR dari primer dengan Tm 60°C adalah….
55°C
56°C
57°C
58°C
60°C
Berdasarkan grafik berikut, sampel yang menunjukan hasil negative ditunjukkan oleh kurva nnomer….
1
2
3
5
7
Berikut adalah contoh setting protokol pada thermal cycler. Berdasarkan contoh tersebut dapat disimpulkan bahwa protokol di atas merupakan contoh aplikasi dari metode? ….
PCR
two-step RT-PCR
one-step RT-PCR
Realtime PCR
Realtime RT-PCR
Yang merupakan pernyataan yang benar mengenai multiplex PCR yaitu : ….
Hanya memerlukan 1 pasangan primer dan probe
Desain, dan optimasi lebih simple
Interpretasi mudah
Hanya bisa mendeteksi 1 target
Dapat mendeteksi lebih dari 1 target dalam waktu bersamaan
Salah satu kemungkinan tidak terbentuknya amplifikasi dalam PCR yaitu karena berikut ….
Menggunakan RNAse/DNAse away
Suhu annealing tidak optimal
Suhu denaturasi 95°C
Mastermix reagen dilakukan di dalam laminar airflow
Menggunakan positif control dan negative control
Berikut ini merupakan pernyataan yang benar mengenai singleplex PCR, yaitu….
Menggunakan lebih dari 1 pasangan primer, probe
Desain dan optimasi menjadi lebih complex
Hanya bisa mendeteksi 1 target
Kemungkinan ada primer-primer competition
Dapat mendeteksi lebih dari 1 target dalam waktu bersamaan
Berdasarkan table fluorophore di atas, dalam tahap design multiplek dengan 2 pasang primer dan probe, pada probe pertama telah digunakan probe dengan flurophore JOE, maka untuk probe kedua tidak menggunakan probe dengan warna yang sama. Probe yang memiliki flurophore yang sama dengan JOE adalah….
TAMRA
FAM
Cy 5
ROX
VIC
Berikut hasil elektroforesis amplifikasi gen E pada virus dengue dengan ukuran target pita DNA adalah 511bp. Elektroforesis dilakukan pada 1,5% agarose, 110 Volt, 40 menit. Nomor 1 sampai dengan 4 adalah sampel, NC adalah kontrol negatif, PC adalah kontrol positif dan M adalah 100bp Marker. Intepretasi hasil sampel nomor 2 adalah? ….
Tes Invalid
Negatif virus dengue
Positif virus dengue
Kontaminasi
Non-specific band
Salah satu metode sekuensing yang menggunakan cara enzimatis, adalah….
Maxam Gilbert
Sanger
Nested
Elektroforesis
PCR polymerase
Kurva standard biasanya digunakan untuk menghitung konsentrasi sampel dalam PCR. Metode PCR yang menggunakan kurva standard adalah….
Nested PCR
Kualitatif PCR
Real time PCR
Quantitative PCR
RT PCR
Pembentukan struktur sekunder tersebut di atas disebut: ….
hairpin
melting temperature
reverse
complement
dimer
Salah satu kriteria dalam merancang primer untuk PCR adalah pemilihan asam nukleat pada ujung 3’. Kriteria tersebut yaitu: ….
Pemilihan 2 basa G dan C (CC, GG atau GC) di ujung 5’
Pemilihan 2 basa T dab A (TA, TT, atau AA) di ujung 3’
Pemilihan 2 basa G dan C (CC, GG atau GC) di ujung 3’
Pemilihan 2 basa T dab A (TA, TT, atau AA) di ujung 5’
Persentase basa G dan C sebesar 40-60%
Tujuan penggunaan Random hexamer pada RT-PCR untuk virus Dengue: ….
Enzim yang berfungsi untuk membentuk untai DNA baru
Sebagai buffer dalam reaksi PCR
Sebagai fluorescent dye
Sebagai kofaktor enzim
Membentuk complementary DNA dari RNA template
Berikut adalah contoh setting protokol pada thermal cycler Berdasarkan contoh tersebut, dapat disimpulkan bahwa protokol di atas merupakan contoh aplikasi dari : ….
PCR
One-Step RT-PCR
Two-step RT-PCR
Realtime PCR dengan Sybr-Green
Realtime RT-PCR dengan Sybr-Green
Virus Hepatitis B merupakan virus DNA untai ganda (partial) yang termasuk pada famili Hepadnaviridae. Berdasarkan hal tersebut amplifikasi DNA virus Hepatitis B menggunakan prinsip dari….
PCR
RT-PCR
DNA sequencing
qRT-PCR dengan Taqman Probe
qRT-PCR dengan Sybr-green
Berikut ini merupakan pernyataan yang benar mengenai Sanger Sekuensing yaitu : ….
Kimiawi
Automasi
Double stranded DNA atau single stranded DNA
Tidak perlu DNA sintesis
Memutus DNA pada nukleotida yang berbeda
Perhatikan gambar berikut! Jenis Primer tersebut adalah: ….
Random Hexamer
Gene-specific primer
Forward
Reverse
Oligo dT
Pada gambar, apabila target amplifikasi yang diinginkan memiliki melt temperature 77.36°C (kurva merah), sedangkan sampel B ditunjukkan dengan kurva berwarna biru, maka dapat disimpulkan ….
Suhu denaturasi kurang tinggi
Amplifikasi sampel B tidak spesifik
Sampel B sesuai dengan target PCR
Ct value 78
PCR mix kekurangan primer
Tahap akhir dari proses perancangan primer adalah….
Download sekuens target dari public data GenBank, EMBL-EBI
Melakukan alignment (penjajaran) sekuens target dari GenBank dengan ClustalW
Melakukan pengecekan primer: adanya pembentukan struktur sekunder, %GC, panjang primer, Tm dan BLAST
Memilih target atau lokasi penempelan primer pada template DNA
Menggunakan software/program Primer3 ataupun Primer-BLAST
Metode deteksi realtime PCR dengan menggunakan SYBR green memiliki kelemahan yaitu kurang spesifik karena SYBR green menempel tidak hanya pada amplicon spesifik tetapi juga pada semua double stranded DNA. Salah satu metode analisis tambahan yang dapat dilakukan untuk melihat spesifik atau tidak nya hasil amplifikasi yaitu dengan….
Melt curve
Ct value
Kurva sigmoid
Suhu annealing
Nested PCR
Pembentukan non-specific band (pita amplifikasi tidak spesifik) dapat terjadi apabila….
GC content primer: 40-60%
Perbedaan suhu annealing antara Primer Forward dan Reverse adalah 2°C
Tm berkisar antara 55-65°C
Panjang primer sekitar 18-25 basa
suhu annealing primer maupun Tm primer terlalu rendah
Yang merupakan salah satu kelebihan realtime PCR dibanding konvensional PCR adalah….
Tidak memerlukan annealing
Dapat mendeteksi dua atau lebih target PCR secara bersamaan
Tidak memerlukan enzim
Hasil dapat dideteksi selama proses berlangsung
Mengurangi primer dimer
Berdasarkan grafik berikut, berapakah perkiraan nilai Ct dari sampel dengan kurva berwarna hijau….
10
19
29
32
22
Virus Influenza A subtipe H3N2 merupakan virus RNA untai tunggal yang termasuk ke dalam famili Orthomyxoviridae dengan ukuran genom sepanjang 13.588bp Berdasarkan hal tersebut deteksi virus influenza A subtipe H3N2 menggunakan prinsip dari: ….
PCR
RT-PCR
DNA Sequencing
qPCR dengan Taqman Probe
qPCR dengan Sybr-Green
Yang merupakan kelebihan Next Generation Sequencing (NGS) dibanding sanger sekuensing adalah….
Sampel yang dibutuhkan lebih banyak
Waktu lebih lama
Dilakukan cloning
Waktu lebih cepat
Dilakukan dengan kimiawi
Gambar berikut ini adalah salah satu contoh dari aplikasi sekuensing ….
Phylogenetic tree
Taxonomy tree
Phenotypic tree
Amplification tree
RFLP
Berikut aplikasi RT-PCR yang paling tepat….
Genotyping bakteri Mycobacterium tubersulosis
Amplifikasi gen penyandi protein 16s rRNA pada bakteri
Identifikasi Candida albicans melalui amplifikasi intron Gen CaYST1
Identifikasi gen E virus dengue pada serum pasien tersangka DBD
Identifikasi bakteri Salmonella typhi dengan Qpcr
Start codon atau methionine disusun dari 3 basa nukleotida, yaitu
AUG
CCC
GCG
AAC
GTA
Hairpin adalah salah satu bentuk dari struktur sekunder dari primer oligonukleotida yang terbentuk dalam reaksi PCR dan perlu dihindari pada saat merancang suatu primer. Bentuk struktur sekunder hairpin yaitu:
