Pendinginan udara di sekitarnya

Aliran konveksi udara ke atas, mencegah kontaminan jatuh ke media

Peningkatan kelembaban relatif

Penghancuran semua spora di udara

Kaca borosilikat atau plastik steril sekali pakai

Logam tahan karat

Kayu

Keramik

Gelas ukur

Pipet volume (pipet gondok) dengan karet pengisap (pipet filler)

Mikropipet

Pipet tetes

Menyediakan sumber api

Menyaring udara yang masuk dengan HEPA filter, menciptakan area steril

Mendinginkan spesimen

Memutar tabung reaksi

Penguapan

Perbedaan densitas dengan gaya sentrifugal

Filtrasi membran

Reaksi kimia

0-4ºC

20-25ºC (suhu ruang)

35-37ºC

55-60ºC

Tusuk (stab)

Gores (streak)

Tuang (pour)

Spread (sebar)

Menginkubasi cawan Petri

Menghomogenkan suspensi sel dalam tabung dengan cepat

Mensterilkan media cair

Memisahkan sel dari supernatant

Pengaduk magnet

Pen dan counter elektronik untuk menghitung koloni yang disentuh

Lampu UV

Sumber panas

Mikroskop stereo

Mikroskop cahaya majemuk dengan perbesaran 1000x

Kaca pembesar

Spektrofotometer

Menghitung setiap sel individu

Mengukur serapan cahaya (optical density/OD) oleh suspensi sel

Mengukur produksi gas

Menimbang biomassa kering

Media yang mengandung air

Sarung tangan karet

Alat gelas (seperti tabung, cawan) dan logam dalam kondisi kering

Larutan enzim

Dipanaskan hingga 50°C

Menambahkan paket katalis dan generator gas (yang menghabiskan O₂)

Dikocok terus menerus

Didinginkan

Kertas saring atau cakram antibiotik

Bagian tubuh mikroba

Larutan asam kuat

Tabung yang sedang panas

Menambah luas permukaan

Mendeteksi produksi gas dengan terperangkapnya gelembung

Mempercepat pertumbuhan

Mengukur pH

Sentrifugasi sambil dipanaskan

Memanaskan dan mengaduk agar-agar atau bahan media hingga larut merata

Sterilisasi media cair

Menyimpan kultur

Sensor optik otomatis

Grid/kotak-kotak berukuran pasti di atas kaca objek khusus

Sumber cahaya UV

Sistem pengocok

Vortex

Ultracentrifuge

Mikrosentrifus

Shaker

Mensterilkan tabung

Menyimpan dan mengatur tabung reaksi agar tidak jatuh/miring

Memanaskan tabung secara langsung

Mengeringkan isi tabung

Menggunakan pewarna fluoresensi

Mengubah beda fase cahaya menjadi beda kontras (terang-gelap)

Memiliki perbesaran 5000x

Bekerja tanpa lensa objektif

Mengawetkan warna media

Menghentikan hampir semua aktivitas metabolisme sel (cryopreservation)

Mensterilkan kultur

Mempercepat pertumbuhan saat dikeluarkan

Air suling

Larutan buffer dengan pH standar (misal pH 4, 7, 10)

Media Nutrient Agar

Larutan NaCl fisiologis

Pengukur suhu dan waktu yang presisi

Indikator visual (perubahan garis/warna) bahwa barang telah mengalami proses sterilisasi

Pengganti fungsi autoklaf

Perekat penutup autoklaf

Mengukur volume cairan secara tidak terlalu presisi (semiquantitative)

Menimbang bahan kimia padat

Inkubasi kultur

Memindahkan kultur secara aseptik

Menjaga suhu konstan pada proses tertentu (misal: mencairkan media, reaksi enzimatis)

Mendinginkan kultur dengan cepat

Mengocok kultur

Mensterilkan alat logam

Media sebanyak 15 mL

Sampel DNA, enzim, atau reagen dalam volume sangat kecil

Larutan desinfektan

Suspensi bakteri untuk plating

Ose jarum

Colony counter

Vortex mixer

pH meter

Memanaskan cairan

Menghisap dan mengeluarkan cairan secara aman (tanpa mulut)

Mensterilkan pipet

Mengaduk cairan

Menginkubasi kultur

Menyimpan bahan dalam kondisi kering (menggunakan silika gel)

Mensterilkan dengan panas

Mengaduk media padat

Fluorokrom

Methylen blue

Gram crystal violet

Safranin

Vortex

Sonikator (Ultrasonic Homogenizer)

Water bath

Oven

Pengocokan dan penginkubasan pada suhu terkontrol

Sentrifugasi dan pemanasan

Pengadukan dan sterilisasi

Filtrasi dan pendinginan

Menimbang media dalam jumlah besar (kg)

Menimbang bahan kimia dalam jumlah kecil untuk pembuatan media/reagen

Mengukur volume kultur

Menghitung koloni

Menerangi pekerjaan

Mensterilkan permukaan interior kabinet (saat tidak digunakan)

Menghangatkan kabinet

Membunuh mikroba di udara saat operator bekerja

Menyerap kelebihan cairan

Sterilisasi cairan dengan metode filtrasi (menyaring bakteri)

Membungkus alat gelas

Indikator pH

Membersihkan lensa

Mengurangi hamburan cahaya dan meningkatkan resolusi

Melarutkan pewarna

Melindungi preparat

Streak

Stab

Spread (penyebaran)

Pour

Hemositometer

Jangka sorong (caliper)

pH meter

Timbangan

Nyala diam dan nyala berputar

Nyala biru (panas) dan nyala kuning (jelaga)

Nyala besar dan nyala kecil

Nyala oksidasi dan nyala reduksi

Dilewatkan (flaming) secara cepat

Direndam dalam api

Dipanaskan hingga memerah

Diletakkan di atas api selama 5 menit

Membiakkan mikroba dalam media cair (broth) atau padat miring

Mengukur volume

Sentrifugasi kecepatan tinggi

Penyimpanan enzim jangka panjang di freezer

Menutup gelas kimia saat pemanasan

Tempat menimbang bahan kimia dalam jumlah kecil

Wadah kultur cair

Alat hitung koloni

Mikroskop fase kontras atau mikroskop medan gelap

Mikroskop elektron

Mikroskop stereo

Mikroskop fluoresensi

Lemari pendingin (kulkas) suhu 4°C

Inkubator 37°C

Freezer -20°C

Suhu ruang

Putaran motor mengocok wadah

Putaran magnet di bawah hotplate yang memutar stir bar (pengaduk magnet) di dalam cairan

Getaran ultrasonik

Aliran udara

Membuang media/kultur bekas pakai yang akan disterilkan

Menyimpan air destilasi

Tempat sampah biasa

Menyimpan cawan Petri bersih

Sampel, operator, dan lingkungan (aliran udara tersaring HEPA)

Hanya sampel

Hanya operator

Hanya lingkungan

Gores di permukaan

Tusuk (stab) ke dalam media agar tegak

Tuang

Sebar

Penyimpanan dan pengamatan kultur stok

Pengujian produksi gas

Pengamatan pergerakan bakteri

Fermentasi dalam volume besar

Robert Koch

Hans Christian Gram

Louis Pasteur

Alexander Fleming

Mengamati flagela bakteri

Membedakan bakteri menjadi dua kelompok besar berdasarkan struktur dinding selnya

Melihat kapsul bakteri

Menentukan umur bakteri

Gram negatif

Gram positif

Gram variabel

Gram netral

Gram negatif

Gram positif

Gram variabel

Gram netral

Keberadaan membran sitoplasma

Ketebalan lapisan peptidoglikan dan keberadaan membran luar

Ukuran selnya

Keberadaan DNA

Lapisan peptidoglikan tipis dan memiliki membran luar

Lapisan peptidoglikan tebal dan tidak memiliki membran luar

Tidak memiliki peptidoglikan sama sekali

Hanya memiliki membran luar

Lapisan peptidoglikan tipis, dilapisi membran luar yang mengandung lipopolisakarida (LPS)

Lapisan peptidoglikan sangat tebal

Tidak memiliki membran luar

Hanya tersusun dari selulosa

Safranin

Kristal violet

Alkohol/aseton

Lugol's iodine

Pewarna penutup (counterstain)

Mordan (pengikat), membentuk kompleks kristal violet-iodin yang tidak larut air

Pemucat (decolorizer)

Pembilas

Pewarna primer

Pewarna penutup

Pemucat (decolorizer)

Pembilas

Kristal violet

Metilen biru

Safranin

Iodin

Safranin → Alkohol → Iodin → Kristal Violet

Kristal Violet → Iodin → Alkohol → Safranin

Iodin → Kristal Violet → Alkohol → Safranin

Alkohol → Kristal Violet → Iodin → Safranin

Pemberian kristal violet

Pemberian iodin

Pencucian dengan alkohol/aseton (decolorization)

Pemberian safranin

Akan berwarna lebih ungu

Tetap ungu karena dinding selnya tebal

Dapat kehilangan kompleks ungu dan akhirnya berwarna merah (false negative)

Tidak berpengaruh

Akan tetap berwarna ungu (false positive)

Akan berwarna merah muda

Akan menjadi tidak berwarna

Tidak berpengaruh

Escherichia coli

Staphylococcus aureus

Pseudomonas aeruginosa

Salmonella typhi

Bacillus subtilis

Streptococcus pneumoniae

Escherichia coli

Clostridium tetani

Tidak memiliki dinding sel

Memiliki lapisan lilin (asam mikolat) yang tinggi pada dinding selnya, memerlukan pewarnaan khusus (Ziehl-Neelsen)

Termasuk bakteri Gram positif yang mudah diwarnai

Selalu berbentuk bulat

Memiliki dinding sel yang sangat tebal

Tidak memiliki dinding sel peptidoglikan sama sekali

Memiliki flagela yang banyak

Selalu berwarna merah alami

Dibiarkan mengering sendiri

Difiksasi dengan cara dilewatkan di atas api Bunsen sebanyak 2-3 kali

Langsung diberi pewarna

Direndam dalam alkohol

Membunuh bakteri dengan cara membakarnya

Mematikan bakteri, melekatkannya pada kaca objek, dan mempertahankan struktur aslinya

Menghilangkan lemak pada dinding sel

Memecah dinding sel

Dibiarkan mengering

Dibilas dengan air mengalir dengan lembut

Dikeringkan dengan tissue

Dipanaskan

Kembali memberi kristal violet

Memberi iodin

Segera membilas dengan air untuk menghentikan aksi pemucat

Langsung memberi safranin

Merah/merah muda

Ungu/biru tua

Tidak berwarna

Hijau

Merah/merah muda

Ungu/biru tua

Tidak berwarna

Hijau

Sederhana

Diferensial (membedakan)

Negatif

Khusus (spora)

Mudah larut dalam alkohol

Sulit larut dalam alkohol

Mudah larut dalam air

Bereaksi dengan safranin

Membran sitoplasma

Lapisan peptidoglikan yang tipis

Lipid pada membran luar, sehingga kompleks ungu-iodin dapat tercuci

Protein inti sel

Pencucian alkohol terlalu lama

Pencucian alkohol terlalu singkat atau preparat terlalu tebal

Pemberian safranin terlalu lama

Tidak menggunakan iodin

Pemberian kristal violet terlalu lama

Pemberian iodin terlalu lama

Pencucian alkohol terlalu lama atau menggunakan kultur bakteri yang sudah tua

Tidak membilas dengan air

Sel bakteri membelah terlalu cepat

Beberapa bakteri mulai kehilangan integritas dinding selnya

Sel bakteri menjadi terlalu kecil

Media mengubah warna bakteri

Batang merah

Kokus ungu, tersusun seperti buah anggur

Kokus merah, berpasangan

Batang ungu

Batang merah pendek (basil)

Kokus ungu

Batang ungu

Kokus merah

Pemilihan antibiotik (misal, penisilin lebih efektif pada Gram positif)

Kecepatan pertumbuhan bakteri

Kemampuan bakteri bergerak

Sumber karbon yang disukai bakteri

Neisseria gonorrhoeae

Vibrio cholerae

Bacillus anthracis

Helicobacter pylori

Streptococcus pyogenes

Neisseria meningitidis

Staphylococcus epidermidis

Enterococcus faecalis

Virus atau jamur

Streptococcus pneumoniae (Gram positif diplokokus) dengan bakteri Gram negatif lainnya

Parasit atau bakteri

Mycoplasma atau Chlamydia

Malaria

Meningitis bakterial

Hepatitis

Tifus

Smear apus

Preparat apusan (smear)

Sediaan basah

Preparat geser

Dipanaskan di atas api

Ditepuk-tepuk pelan atau dikibas-kibaskan di udara, lalu diangin-anginkan

Dikeringkan langsung dengan tissue agar cepat

Dibiarkan semalaman

Sel epitel

Area yang tidak terlalu padat atau tepian preparat untuk melihat sebaran sel bakteri

Bagian tengah yang paling tebal

Sel darah putih

Warna reaksi Gram, bentuk sel (morfologi), dan susunan sel

Hanya warna saja

Hanya ukuran sel

Keberadaan spora

Gram negatif basil

Gram positif basil (dan membentuk spora)

Gram positif kokus

Gram negatif kokus

Gram positif batang melengkung

Gram negatif batang melengkung seperti koma

Gram negatif kokus

Gram positif kokus

Bakteri penyebab infeksi kulit

Archae (karena memiliki komposisi dinding sel yang berbeda)

Bakteri dari sampel urin

Bakteri penyebab diare

Pasti terjadi kontaminasi

Kemungkinan terdapat lebih dari satu jenis bakteri (campuran)

Kesalahan teknik pewarnaan

Bakteri yang sedang membelah

Pertanda normal

Petunjuk penting adanya infeksi bakterial

Hasil yang pasti tidak akurat

Artefak dari pewarnaan

Diteteskan lalu dibiarkan 1 menit

Diteteskan lalu segera dibilas (sekitar 5-15 detik, tergantung ketebalan preparat)

Direndam selama 5 menit

Disemprotkan

Murah, cepat, dan memberikan informasi dasar yang sangat berguna

Dapat mengidentifikasi spesies bakteri secara pasti

Tidak memerlukan mikroskop

Selalu memberikan hasil 100% akurat

Diberi minyak imersi dan ditutup dengan kaca penutup

Dibersihkan dengan alkohol

Direndam dalam air

Dikeringkan dan disimpan tanpa penutup